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BRCA1分子生物学特性及乳腺癌发生发展 　【关键词】 乳腺癌 乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率有上升趋势，它的发展主要经历一系列复杂的细胞和分子遗传学改变。BRCA1是一个抑癌基因，其结构和功能的异常与乳腺癌的发病密切相关。它在调节细胞周期进程、DNA损伤修复、细胞生长与凋亡及转录活化与抑制等多种生物学途径都起重要作用。但目前有研究表明它的异变并不直接导致肿瘤的发生，而是通过造成基因不稳定性，使细胞处于高风险的恶化边缘。 1 BRCA1基本构成及其相关功能 BRCA1基因定位于人体第17号染色体上，具有24个外显子，编码一个具有18个氨基酸的蛋白质［1］。氨基末端的环指结构以及羧基末端的两个BRCT功能区是存在于多种蛋白中的保守功能区。除此之外，未见这与其他蛋白同源。多数与肿瘤相关的点均发生在这两个保守的功能区内。 其中的环状结构是保守的半胱氨酸和组氨酸残基组成的锌指结构，它介导蛋白与蛋白和蛋白与DNA之间的相互作用［2］。这个结构还负责BRCA1的同源二聚体及BRCA1与bard1（BRCA1 associated ring finger domain）异源二聚体的形成。在细胞中gt;75％的BRCA1以bard异源二聚体的形式存在。有实验证明，在DNA损伤的情况下，该二聚体有泛蛋白E3连接酶的功能，介导RNA聚合酶的大亚单位的降解［3］。 BRCT功能区由85～95个氨基酸组成, 中心部分是保守的疏水氨基酸。此功能区普遍存在于DNA修复和细胞周期调控相关的蛋白之中。BRCA1中多数与肿瘤相关的突变均可导致BRCT功能缺失，可见此功能区的重要性。BRCT中多个带负电的残基jo 显示其有转录调节功能。因为在真核细胞转录因子中，这种高度酸性区域通常与转录激活相关［4］。 2 BRCA1异变与遗传不稳定性 目前已发现的BRCA1的突变超过500种。通过对BRCA1相关性乳腺癌的研究发现，与不携带BRCA1突变的乳腺癌相比，前者常含有更多的非整倍体。HCC1937, 一个从含有BRCA1纯合子缺失的乳腺肿瘤衍生出来的细胞链中多数细胞都呈现染色体数止异常、PTEN纯合子的丢失，以及参与肿瘤发病机制的多个位点的杂合子丢失的情况［5］。BRCA1的缺失不但可以直接导致基因组的异常，还可以造成损伤DNA修复障碍以及中心粒的扩增和所有重要的细胞检测点的异常，而这些正是BRCA1突变细胞遗传不稳定性的原因所在。 2.1 细胞周期中的检测点与DNA的修复作用 大多数肿瘤都表现出染色体的不稳定性，如染色体结构异常和非整倍体，以及染色体的增加或缺失。DNA损伤修复可以使细胞转化为正常细胞或进入细胞凋亡过程。DNA损伤修复功能和凋亡受抑制是基因突变和肿瘤形成的原因之一，DNA损伤修复功能缺失在凋亡信号转导缺失的细胞中，导致大量的损伤细胞存活从而引起肿瘤的发生。DNA损伤修复对维持基因组的完整至关重要［6］。实验证明，BRCA1与细胞中多种负责DNA损伤修复的蛋白有相互作用，如Rad50、Rad51、PCNA、BRCA2、Mre11、ATM、ATR等。Rad51是与酵母RecA同源的参与真核细胞双链断裂及同源重组的重要成分。Rad50、Mre11、Nibrin都是在同源重组及非同源重组的末端重接等DNA修复过程中起重要作用的蛋白因子。正常情况下，BRCA1、Rad51、BRCA2等共存于一些散在的核小点中，当DNA受到损伤时，核小点分散，这些蛋白重新汇集到损伤处的DNA复制位点。BRCA1还能与Rad50/Mre11/Nibrin复合物相互作用，共同参与DNA损伤的应急反应［7］。HCC1937细胞中，这种复合物的形成急剧下降，而外源性表达野生型BRCA1蛋白可使复合物的形成恢复正常。BRCA1非特异性结合DNA的发现为BRCA1参与DNA损伤修复提供了有力的证据。当DNA受损伤后，组蛋白,H2A家族成员快速磷酸化，将BRCA1汇集到损伤位点，结合到DNA断裂处，或与Rad51、BRCA2形成复合物，或与Rad50/Mre11/Nibrin复合物相互作用，对损伤DAN进行修复［8］。而细胞周期准确无误的运转对于维持基因组的稳定性非常重要，DNA损伤因子如：紫外线照射、阿霉素、顺铂等都会让细胞停留在G1/S期，S期以及G2/M期,以给细胞一个修复自身的时间。而那些调定细胞步伐的检测点可以确保细胞工作在它准备进下一个期之前的完备性［9］。BRCA1在这个过程中起着重要的作用。正常情况下，BRCA1可以与细胞周期素依赖性激本科及细胞周期A、D结合，随细胞周期的时相性变化，呈现磷酸化和去磷酸化两种状态的交换，在G1晚期和S期出现高磷酸化的状态，在M期后转为去磷酸化状态。当DNA损失时，BRCA1作为一种负性调控因子参与细胞周期检测