大鼠被动型Heymann肾炎模型建立及抗体剂量关系探析.docVIP

大鼠被动型Heymann肾炎模型建立及抗体剂量关系探析 　【摘要】 目的：通过对被动型Heymann肾炎模型的建立与抗体剂量关系的研究，进一步探讨膜性肾病的发病机制。方法：成年雄性SD大鼠分为A、B、C 3组，分别经尾静脉注射抗 FX1A抗血清1 ml/100g、0.5 ml/100g以及生理盐水1 ml/100g，1周后检测24 h尿蛋白定量、血清白蛋白、血清肌酐、血清三酰甘油以及总胆固醇，分别在普通光学显微镜和透射电子显微镜下观察大鼠肾组织的病理学改变。结果：被动型Heymann肾炎模型的建立与SD大鼠尾静脉注射抗FX1A抗血清的剂量存在正相关。结论：膜性肾病的发生可能与抗体剂量有关。 【关键词】 膜性肾病；被动型Heymann肾炎；过碘酸银甲胺染色 [Abstract] Objective: To investigate the relations of antibody dose-response in passive heymann nephritis and try to provide the evidence for membranous nephropathy in pathogenesis. Methods: Male Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into three groups and were injected with anti-FX1A serum(1 ml/100g, 0.5 ml/100g) and physiological saline (1 ml/100g) in difference through caudal vein. After a week, twenty-four hours urine protein, serum albumin, secrum creatinine, secrum triglyceride and secrum total cholestorel were observed respectively. Glomerular lesions were measured by light and electronic microscope. Results: The SD rats developed the typical clinical and pathological patterns of MN in response to an optimum dose of anti-FX1A serum. Conclusion: MN generation may be related with antibody doses. [Key words] Membranous nephropathy; Passive Heymann nephritis； Periodic acid silver methanamine 膜性肾病(membranous nephropathy, MN)是成人肾病综合征常见的病理类型之一，但其发病机理尚未明确。大鼠Heymann肾炎(Heymann nephritis, HN)模型的病理改变及表现与人类膜性肾病十分相似，已作为人类膜性肾病的模型普遍应用，其中被动型Heymann肾炎(passive Heymann nephritis, PHN)系予大鼠直接静脉注射抗肾小管刷状缘提取物(Fx1A)的抗体(或抗血清)诱发，模型较为稳定，制备所需时间相对较短，被广泛用于实验研究[1]。有关PHN模型建立过程中Fx1A抗体的剂量反应关系国内外报道较少，本研究旨在探讨PHN的建立与抗体剂量反应的关系，为膜性肾病发病机制的实验研究奠定基础。 1 材料和方法 1.1 实验动物 清洁级健康雄性SD大鼠，体重200~250 g，由南通大学实验动物中心提供；普通级健康雄性新西兰大耳兔，体重2.5 kg，购自南京金陵种兔场。饲养环境温度维持在（20±2）℃，分笼饲养，标准饲料，自由摄水，12 h交替照明。 1.2 方法 1.2.1 Fx1A提取 参考Malathi等（1979）方法改良。健康雄性SD大鼠3%戊巴比妥（50 mg/kg）腹腔麻醉后于无菌条件下取肾皮质，按1∶30 （v/w）加入50 mmol/L甘露醇/2 mmol/L Tris HCl（pH 7.0）在冰浴中制成匀浆；加1 mol/L CaCl2至终浓度为10 mmol/L，4℃ 3 000 g离心15 min，取上清液，43 000 g再离心20 min，取沉淀用50 mmol/L甘露醇/2 mmol/L Tris HCl（pH 7.0）重复洗涤1次。重复上述步骤1次。取沉淀加入0.01 mol/L PB