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摘要
本文成功的制备了三种磁性载体:聚乙烯醇磁性载体、琼脂磁性载体和琼脂
糖磁性载体。溪中,利用聚乙烯醇为包埋材料,通过氧化沉淀法制备磁流体,以
戊二醛交联法翻备了聚乙烯醇磁性载体;利用琼脂为包埋材料,通过乳液法包埋
共沉淀法制备的磁流体中的磁性胶粒,得到琼脂磁性载体;利用琼脂糖为包埋材
料,通过乳液法包埋磁粉得到琼脂糖磁性载体。通过和色素配基辛巴蓝共价偶联
得到亲和载体。用于蛋白质的吸附。透射窀镜和光学显微镜的分析表明,载体为
核一壳结构√这三种磁性载体在磁场中具有强磁响应性。
以溶菌酶和牛血清白蛋白为模型蛋白,研究了这三种磁性亲和载体的吸附性
能,并考察了离子强度、温度、pH和吸附时间等因素对吸附的影响。载体对蛋
白质的吸附行为可以用Langmuir吸附模型来描述。
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聚乙烯醇磁性亲和载体在较低修饰密度下(3 pmol/g),吸附容量可以达
min内达到
到70mg/g。对于溶菌酶和牛血清白蛋白两种蛋白质的吸附可以在20
平衡,这暗示了聚乙烯醇磁性亲和载体的快速吸附性能不会因为蛋白质的分子量
不同而改变。对于琼脂磁性载体和琼脂糖磁性载体吸附牛血清白蛋白存在一个最
佳的离子强度,分别是O.06mol/L和0.2mol/L。通过研究琼脂磁性载体和琼脂
糖磁性载体的吸附动力学,可以得出结论:相对于其它载体,这两种载体更适于
在生物分离中应用。
将聚乙烯醇磁性亲和载体用于从酵母细胞破碎液中提纯乙醇脱氢酶。研究表
明,在合适的条件下,可以得到60%的回收率和5倍的纯化因子。
关键词:磁性亲和载体,蛋白质吸附,磁分离,蛋白质分离
Abstract
Threekindsof supports:poly(vinylalcoh01)magneticsupports,agar
magnetic
and alcoh01)
magneticsupportagarosemagneticsupports,wereprepared.Poly(vinyl
was asan materialto the fluid oxidization
utilized entrapment preparemagneticby
in were with
colloid thefluid Cross·linked
precipitation.Themagnetic particles
asa to
glutaraldehydecross—linkingreagentpreparepoly(vinyl
supports(PVA-MASs).Agar-basedmagneticsupports(Agar-MASs)weresynthesized
the colloid inthe were
particles fluid,whichprepared
byentrappingmagnetic magnetic
bythe Agarose—basedmagnetic
co-precipitation.
all
t0 the emulsificationmethod.Cibacronblue
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