黄颡鱼卵致病性绵霉的分离鉴定与药敏特性.PDFVIP

微生物学通报 SEP 20, 2012, 39(9): 1280−1289 Microbiology China © 2012 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 黄颡鱼卵致病性绵霉的分离鉴定与药敏特性 1△ 1△ 2 1 1 1* 欧仁建 曹海鹏 郑卫东 胡鲲 许佳露 杨先乐 (1. 上海海洋大学 国家水生动物病原库 上海 201306) (2. 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北 武汉 430223) 摘 要: 【目的】对黄颡鱼水霉病病原进行分离鉴定, 并对其药敏特性进行研究。【方法】 参照传统方法对患水霉病的黄颡鱼卵上的丝状真菌进行分离, 通过人工感染实验证实分 离菌株的致病性, 然后根据形态学特征和ITS rDNA 序列分析对致病菌株进行鉴定, 并进 一步采用倍比稀释法研究其药敏特性。【结果】从患水霉病的黄颡鱼卵上分离到8 株丝状 真菌, 经人工感染试验证实菌株YC 对黄颡鱼卵具有致病性, 并进一步研究了其形态与药 敏特性, 开展了ITS rDNA 序列分析。结果表明, 菌株YC 为透明管状结构, 中间无横隔; 游动孢子囊多呈圆筒形、棍棒形或穗状, 游动孢子发育成熟后不断从孢子囊顶端释放出 来, 成团聚集在游动孢子囊口, 并经过一个时期的静休后, 成团脱落或直接分散在水中游 动; 次生孢子囊具有典型的侧生现象; 藏卵器呈球形或梨形, 大多与雄器异枝, 少数与雄 器同枝, 含 1−15 个卵孢子; 成熟卵孢子中生或亚中生, 偏生一个大油球。其ITS rDNA 序 列与 GenBank 基因库中绵霉属菌株自然聚类, 同源性高达 99%, 与异丝绵霉(Achlya klebsiana) 菌株CBS101.49 (GenBank 登录号AF119579) 的亲缘关系最近。结合形态特征与 ITS 序列鉴定的结果, 判定菌株YC 为异丝绵霉(Achlya klebsiana ) 。此外, 在实验选用的中 草药和消毒剂中, 黄连和异噻唑啉酮分别对菌株YC 的抑菌效果最好, 其对菌株YC 的最 小抑菌浓度分别为256 mg/L 和2 mg/L 。【结论】首次分离了黄颡鱼卵致病性异丝绵霉菌 株YC, 并确定了其药敏特性, 可以作为该病防治用药的依据。 关键词: 黄颡鱼卵, 绵霉, 鉴定, 最小抑菌浓度 基金项目：国家 863 计划项目(No. 2011AA10A216); 现代农业产业技术体系建设专项资金项目(No. CARS-46-12); 公益性行业(农业)科研专项(No. 201203085); 上海市科技兴农重点攻关项目 [沪农科攻字(2011)第 4−8 号] *通讯作者：Tel: 86-21 Fax: 86-21 : xlyang@ △共同第一作者 收稿日期：2011-12-10; 接受日期：2012-02-06 欧仁建等: 黄颡鱼卵致病性绵霉的分离鉴定与药敏特性 1281 Identification and drug susceptibility of a pathogen