试验技术.PDF

第二章 實驗技術 2-1 時間相關單光子計數系統（ Time-Correlated Single Photon Counting ，TCSPC ； Fluo Time 200 ，PicoQuant ） 實驗的進行主要採用 PicoQuant 公司所生產的時間相關單光子計數系統來進行時間- 解析螢光光譜（ time-resolved fluorescence spectra ）的測量。 TCSPC的一般工作原理如圖 2-1所示。 [1]經由脈衝光源週期性激發樣品進行單一光 子的偵測，並精確的紀錄所偵測到的光子訊號與雷射同步觸發訊號（synchronization trigger ，SYNC trigger ）的相對時間，並對單一光子所測得的相對時間進行累計，重建螢 光訊號波形。實驗需在「每個週期所偵測到的光子數目遠小於 1」的量測條件下進行， 方可重現實際放光訊號波形。 [2] TCSPC的儀器配置如圖 2-2所示。 激發光源為脈衝式的二極體雷射（ pulsed diode laser ），可產生最小半高寬（full width half maximum ，FWHM ）約為50 ps的脈衝。當雷 射輸出時，由光源本身的控制器（ driver ；PDL 800-B ，PicoQuant ）送出同步觸發訊號， 經由分數式時間鑑別器（constant fractional discriminator ，CFD ）判別訊號有效與否並設 定訊號到達時間，再由可調節式延遲器（variable delay line ；425A ，ORTEC ）調整進入 TCSPC 模組（ SPC630 ，PicoQuant ）的延遲時間。激發光源經由一面反射鏡導向樣品室 （sample chamber ），可經由調整鏡面上的兩個旋鈕控制導向樣品的雷射光方向，反射鏡 前具有一光圈（ iris ）可調節進入樣品室的雷射光通量，接著通過一個聚焦透鏡（focusing lens ）聚焦到樣品上。樣品的放光利用兩面透鏡進行收集，再經由一個光圈調節收集的光 通量及一可選擇垂直（ perpendicular ）、水平（horizontal ）以及魔術角度（magic angle ）偏 振方向的偏振器（polarizer ）。接著通過相減式的雙光柵光譜儀（subtractive double [1] Becker, H. GmbH, Time-Correlated Single Photon Counting Modules Multi SPC Software. [2] web site ：.tw/tcspc_pop.htm 11 圖 2-1. TCSPC的工作原理。 圖 2-2. Fluo Time 200 儀器配置圖。 12 monochromator ；9030DS ，Sciencetech ），再進入偵測器。偵測器為多頻道光電倍增管 （micro-channel plate photon-multiplier tube ，MCP-PMT ；R3809U-57 ，Hamamatsu ），其輸 出的電流值經由一個前置放大器（Pre-Amplifier ）將訊號轉換成正電壓值並放大以達到 TCSPC模組可以接受的範圍，接著進入 TCSPC模組進行訊號計時的工作。 TCSPC 模組進行訊號計時的程序如圖 2-3所示。利用兩個分數式鑑別器（ constant fractional discriminator ，CFD ）分別判別螢光及觸發訊號有效與否並決定其所到達的時 間，再以標準訊號（ NIM ）送入時間-振幅轉換器（time-to-amplitude converter ，TAC ）中。 當 TAC 收到螢光訊號，內部的電容便開始充電，直到收到下一發觸發訊號時停止充電， 並產生電壓輸出，所輸出的電壓振幅正比於兩訊號輸入 TAC的相對時間差。最後以類比 數位轉換器（- analog-to-digital conve