里薰RA1D标记检测与水稻株高和N穗=有关的QTLS.PDF

遗 传 学 报 250):34^39,1998 ActaGeneticaSinica 应用RAPD标记检测与水稻株高和 抽穗期有关的QTLs 李春丽 郑康乐 （中国水稻研究所生物工程系 杭州 310006) 摘要 以生产上广泛应用的杂交稻组合汕优10号的保持系珍汕97B和恢复系密阳46构建乓 群体。应用RAPD标记检测，分析了与株高和抽穗期有关的QTLs，并探讨了基因的互作方式． 在F2群体中性状表型分离明显，基本符合正态分布。单因子方差分析检测到’歹抽穗期和株高 相关的标记数9个，并计算了单个QTL对相关性状的贡献率。双因子方差分析发现上述检测 到的QTLs之间大多不存在互作，但发现了一些有显著互作的新的QTLs，其互作贡献率远大 于单因子方差分析检测到的QTLs，说明该群体中株高和抽穗期主要由不同座位间的互作控 制，进一步的分析表明互作方式以重叠基因为主。 关键词 RAPD，数量性状座位Q（TL)，水稻，重叠基因 分类号 Q348 RAPD (RandomAmplifiedPolymorphicDNAs）是利用含有10或（9）个碱基的随机 引物 单（引物），通过聚合酶链式反应 P（CR)对模板DNA进行随机扩增，根据扩增的某一 DNA片段的有无来比较不同基因组DNA的差异M。由于进行RAPD分析时可用的引物 很多，利用一系列引物则可以使检测区域几乎覆盖整个基因组，因此RAPD可以对整个基 因组DNA进行多态性检测。目前RAPD已广泛地应用于植物遗传育种的各个领域。 应用RAPD标记检测群体 包（括杂种二代、回交一代、重组近交系和双单倍体等），根 据分子标记基因型在群体中分离的结果，可计算标记间的交换值，确定标记的排列顺序和 在图谱上的遗传距离。此外，应用RAPD标记可以对所构建的RFLP连锁图加以相互叠加 和充实[21［，这些高密度的图谱为数量性状座位Q（TLs）的定位研究奠定了基础。 利用高密度的分子连锁图谱可以进行作物重要性状如产量(3]［、株高、抽穗期a()、果实及 种子成分含量等的QTLs的作图，可以推算出控制数量性状的基因数目、确定QTLs在染 色体上的位置、测定单个基因的效应151［，进而用于改良群体。 1 材料和方法 1.1水稻供试材料与性状考查 以生产上广泛应用的杂交稻组合汕优 10号的保持系珍汕97B和恢复系密阳46分别 作为本研究的母本(P（I）和父本几（），配制组合，构建F2群体。PI和P,的种子均由中国水稻 本文于1996-08-19收到，1997-01--10修回 1期 李春丽等：应用RAPD标记检测与水稻株高和抽穗期有关的QTLS 35 研究所育种系提供。 1995年夏在杭州种植供试群体的各世代材料。P，和P2各种植32株，F、种植24株，巩群 体种植240株，4月20日播种，5月20日移栽，随机排列，行株距为23x23cm，常规田间管 理。在分粟期从每个稻株册一小分粟单独种植，专供取叶片提DNA之用。 对亲本、F,和F2群体进行表型考查。在抽穗时逐株记载抽穗期，再换算成播种至抽穗 的天数；成熟期逐株测量株高。 1.2亲本、F,及巩群体的RAPD检测 对亲本P,和几、E以及在巩群体中随机选取108个个体进行RAPD分析。DNA的提 取参照卢扬江等b]‘的方法，RAPD反应参照陆军等01［的方法。 1.3 数据分析 应用统计软件BSTAT①中的QTLA程序以各标记为因子，对全部性状进行单因子方 差分析，以获得与数量性状紧密连锁的标记座位，显著水准P0.05。用组间方差与总方 差的比值求得这一标记对该性状的贡献率。 应用BSTAT中的QTLI程序分析任何两个不连锁标记的互作显著性，P0.001。计 算出任意两个标记座位组内的方差以及两个标记座位间的方差，并求得这两个标记座位 由于互作而对性状的贡献率。 2 结果与分析 2.1性状表型及其变异 在株高、抽穗期这两个性状中，父本的性状表型值均比母本大。其F！代的杂种优势显 著，性状整齐一致，且E代的结实率较高，为91.03%0 株高和抽穗期在F2群体中均表现显著地分离。从两个参数— 偏度和峭度来看抽（ 穗期skewness＝0.8