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蛋白质分离采用膜层析：机遇与挑战 抽象 使用合成孔和微孔膜作为层析介质填充床色谱的一些相关的问题，是可以克服的。本文综述了目前的发展状况，在该地区的膜蛋白质的色谱分离。膜色谱的运输现象简要讨论，并在这方面所做的工作进行检讨。它已被用于蛋白质的分离，以及与不同的应用程序，各种分离化学评论。膜色谱技术所面临的挑战，突出显示，并的范围为今后的工作进行了讨论。 关键词评论 ;膜色谱 ;固定相，LC 1介绍 色谱法是迄今为止最广泛使用的用于高分辨率的蛋白质分离和分析技术。传统上，这些过程被进行使用填料床，其中有几个主要的限制。填充床的压降普遍偏高，往往会增加在一个过程中，由于床合并（介质变形引起的）的综合影响，造成的胶体物质积累的列致盲。与常规的色谱生化分离过程，特别是那些采用软色谱介质，另一种主要的限制是依赖于颗粒内扩散的溶质分子的结合位点（参照图1）这样的介质的孔隙内的运输。这增加了处理时间，因为运输的大分子通过扩散是缓慢的，尤其是当它被阻碍。因此，回收液量（洗脱所需的）也增加。沟流，即形成流路由于开裂的填充床，是一个大问题。这会导致短路物质流，导致病床使用率不佳。其他问题包括从使用传统的多分散介质所产生的径向和轴向扩散限制。其中的一些因素的运输现象是复杂的事实，使填充床层析过程中难以规模的扩大。 图 1 溶质运移填充床色谱和膜色谱。 填充床色谱法的一些设计上的限制已被克服，通过使用新开发的单分散性的，无孔的，刚性的色谱介质（例如，参考文献[1] 和 [2] ）。然而，这些媒体通常是昂贵的和溶质的结合能力大大降低自结合现在可以只发生在外部表面。此外，与这些材料中，高压降的问题依然存在。 是一种完全不同的方法来克服的局限性，与填充床使用化学合成的微孔或大孔膜层析介质（如文献[3] [4] [5][6] ）。其结合位点的溶质运输在膜色谱过程中发生主要通过对流（参照图1），从而减少了处理时间，而且回收液量。的结合效率一般是独立的进料流率，在很宽的范围内，也可以使用，因此非常高的流动速率。的压力损失也显着低于与填充床。另一个主要优点是膜吸附填料床规模相比相对容易。然而，这种潜力还没有得到充分的利用尚未在生物工艺行业。膜色谱法特别适合于较大的蛋白质（即M ? 250 000）。这样的蛋白质很少进入孔隙中存在的微粒色谱介质的外部可用的表面积，这样的介质上的唯一的绑定。因此，对于较大的蛋白质，可用于绑定的表面积与膜显着更大。较小的蛋白质的结合能力的膜吸附在一般低于传统的基于凝胶的媒体，但明显高于单分散性的，无孔的，硬介质。 膜色谱设备一般都是大量生产更容易，更便宜。这使得有可能有??一次性膜吸附器。这些设备可以使用，直至维持理想的性能（即液压通透性，结合能力，选择性和分辨能力）。一旦他们停止正常运作这些设备可以更换。消除这种类型的灵活性的要求，以便进行清洁设备重新生效。 利用不同的化学分离的蛋白质在膜色谱。已发现一些已在使用中的膜分离过程的其他类型的（例如微滤）膜是适合作为色谱介质。然而，在大多数情况下，这些可用的膜已被修改，以使它们更适合用作膜吸附器。也已经开发新型合成膜。填充床色谱分离，膜色谱具有一定的相似之处，另一种方法是基于巨石列上使用。这些列被用棒状的多孔结构，通过对流流动相可以发生。整料列的主要优点是膜色谱相似。然而，不同的膜材料的结构和形态方面巨石。虽然膜顾名思义就是横向尺寸远远超过了纵向尺寸的障碍，相反可能是真实的巨石。巨石或许更类似于比膜填充床色谱柱。 在这篇评论文章中，膜色谱的发展在该地区的当前状态进行了讨论。发表的文献中的蛋白质膜色谱领域的审查（例如 膜层析潜在的局限性还强调，这项技术更广泛地接受，在很大程度上取决于找到解决这些限制。 2。膜层析运输现象 膜色谱法的优点在于对流物质运输的主导地位。然而，显而易见的，从图。1，扩散输运不完全缺席。单独对流的优势不一定能保证效率。对流不合适的类型可以是一个严重的缺点。流量分配色谱和确实大多数类型的分离过程中的一个主要问题。设计合理的膜层析工艺和设备是可能的，只有当涉及的运输现象，正确理解。但是，它可能是值得一提的是，在许多的层析过程中，特别是那些依赖亲和型的相互作用，结合动力学进行限制。在这些方法中，在传输现象的改善是可能导致过程的效率显着改善。 一般来说，膜吸附器的三种类型的用于对蛋白质生物分离：平片，中空纤维和径向流。单平板很少被采用。更多的时候，一些平板堆被安置于膜组件。除了 ??提供更多的吸附剂体积，膜堆栈的使用具有下面讨论的某些其他好处。的中空纤维膜具有一个管状的几何形状通常范围从0.25到2.5毫米的直径与管。中空纤维膜吸附通常由几百纤维管壳式换热器型配置中的一个模块内盆栽的捆绑。径向流吸附器的制备是通过螺旋缠绕的平片膜的多孔圆筒形芯图