生化工程第七章 固定化酶、固定化细胞.ppt

第七章 固定化酶、固定化细胞 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 将米氏方程代入 整理：CSTR操作特性方程为： 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 工程上要求，在最短的操作时间内，用最少量的（固定化）酶，达到最大的产物生成量、最高的底物转化率，以使生产成本最低。(这些条件称之为反应器效率。) 下面比较CSTR和PFR的反应器效率： （3）PFR和CSTR反应器的生产时间比较 为了方便比较，把操作方程改写为 ： 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 x应在80﹪以上。 达同样的转化率，F值差别很大。 而且S0/Km越小，差别越显著。 结论：PFR的停留时间小于CSTR的停留时间 同一反应，工艺条件相同，转化率相同，PFR 和 CSTR所需的时间不同。转化率越高，两者差距越大。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 （4）PFR和CSTR反应器的用酶量比较 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 反应器体积一定，达到相同转化率时， ECSTR/EPFR 与转化率的比较 转化率x愈高， Km/S0 越大，用酶量的差别越大。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 在给定的反应体系下，反应器中的装酶量为定值，达一定x下反应器所需酶量愈少；反应器的反应有效容积也就愈大。可见PFR的生产能力比CSTR的大。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 第五节 固定化酶、细胞反应器及动力学 1.固定化酶、细胞反应器 反应器的类型和特点 (1)间歇式搅拌罐反应器 用于游离酶反应后随即放料。 (2)连续流动搅拌罐反应器 连续进料、连续出料 (3)填充床反应器 固定化酶填充于床层内。反应器内的流体的流动形态为活塞流形。底物以恒定流速通过反应床。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 (4)流化床反应器 底物以足够大的流速向上通过固定化酶床层，使固体颗粒处于流化状态。 (5)循环反应器 部分反应液流出和新加入底物流入液混合，在进入反应床进行循环。 (6)连续流动搅拌罐-超滤膜反应器 由连续流动搅拌罐反应器和超滤装置组合而成。在连续流动搅拌罐的出口处装有半透膜。 (7)其它反应器 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 人工肾： 原理：将病人血液中的尿素经脲酶水解成氨，再用活性炭吸附。即：用固定化脲酶和微胶囊活性炭组成人工肾。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 酶传感器 固定化酶和电化学传感器的结合。 优点： ①既有不溶性酶体系的优点，又具有电化学电极的高灵敏度； ②酶的专一反应性，使其具有较高的选择性，能够直接在复杂试样中进行测定。 1967年Updike等采用酶的固定化技术，将葡萄糖氧化酶固定在疏水膜上，然后再和氧电极结合，组装成了世界上第一个生物传感器葡萄糖氧化酶电极。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 酶电极示意图 ?-D-葡萄糖＋O2→D-葡萄糖酸-1,5-内酯＋H2O2 半透膜 酶胶层 感应电极 根据反应中消耗的O2、生成的葡萄糖酸和H2O2的量，可以用氧电极、pH电极和H2O2电极来测定葡萄糖的含量。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 生物识别元件是酶、抗原(体)、细胞器、组织切片和微生物细胞等生物分子经固定化后形成的一种膜结构，对被测定的物质有选择性的分子识别能力。 生物传感器(酶传感器)原理 由生物识别单元（如酶、微生物、抗体等）和物理转换器相结合所构成的分析仪器。 换能器将识别元件上进行的生化反应中消耗或生成的化学物质，或产生的光或热等转换为电信号，并呈现一定的比例关系。 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 酶传感器工作原理示意图 酶传感器主要由固定化酶膜和变换器组成： 固定化酶膜：选择性地“识别”并催化被检测物质发生化学反应； 变换器：把催化反应中底物或产物的变量转换成电信号，通过仪表显示出来。? 生物工程专业课程 生化工程 第七章 固定化酶 固定化细胞 第三节 固定化酶、细胞反应动力学 影响固定化酶反应动力学的因素可归纳下列几个方面： 酶活性与酶分子的三维空间结构有关。酶分子被固定时，其构象将发生改变，酶活性部位的三维结构可能改变，从而改变