探讨猪胚胎移植要点.docxVIP

猪胚胎移植关键点讨论摘要：由于猪的生长周期短，商品化程度高，传统的生产繁殖方式已经不能满足需要，胚胎移植技术应运而生。本文论述了猪的胚胎移植各个关键控制点和目前所应用的技术，以及在 生产实践中的应用。关键词 胚胎移植 技术 冷冻1890年 Heape在英国剑桥大学首次报道获得兔子胚胎移植成功以来，胚胎移植技术已有100多年的研究历史。20世纪30年代以来，胚胎移植的研究越来越多，对各种家畜均获成功，主要有绵羊（1934）、山羊（1949）、猪（1951）、牛（1951）、马（1974）。1975年1月在美国科罗拉多州召开了第一届国际胚胎移植学会成立大会，标志着胚胎移植技术进入了更高的发展阶段。,1976年牛的非手术移植技术推广，1977年开始商业化应用，13个国家成立了数百家商业化胚胎移植公司。仅北美洲 ,1978年移植后妊娠的牛近 1万例，目前仅美国每年通过胚胎移植技术而妊娠的牛达30万[1]。而猪的胚胎移植，一方面由于猪是多胎动物，胚胎移植被陷入应用范围较窄的误区；另一方面是由于配套的非手术取卵和移植及胚胎冻存很困难， 因此至今未能像牛、羊那样被广泛应用。综合国内外目前的已有技术和水平，猪胚胎移植技术的应用已处于水到渠成的阶段， 并且能够给种猪的生产经营者带来可观的经济效益。从妊娠的母猪子宫内取出受精卵， 将其移植到发情周期相同的其它母猪体内， 并使其妊娠、 着床、 分娩的过程就是猪的胚胎移植技术。猪的胚胎移植 1951 年在世界上首次获得成功。出于猪的生殖系统构造复杂及猪受精卵对低温抵抗力较弱等原因， 猪胚胎移植技术目前还未得到普及。但是，近年来，作为猪群净化和繁殖改良的手段，已被世界养猪界所关[2]。1前期准备在初产母猪的正常发情周期的第 15天或 16 天，用 1000—1500IU的孕马血清促性腺激素皮下或肌肉注射， 平均可排卵 20--30个。或者孕马血清促性腺激素和人绒毛膜促性腺激素配合使用， 即在性周期第 15天注射孕马血清促性腺激素1000IU后再注射人绒毛膜促性腺激素500IU可有效增加排卵数。经超排处理的初产母猪于给予孕马血清促性腺激素后 4天开始发情， 比正常发情时间要早1天。初情期前的青年母猪（5--6）月龄同样可以进行超数排卵处理。一般用250—2000IU的孕马血清促性腺激素肌肉注射，48小时后再用 500IU人绒毛膜促性腺激素，24小时后进行人工授精，平均22个排卵数获得13个受精卵。青年母猪对孕马血清促性腺激素反应有明显的季节性差异， 其它季节要使用春季用量的2倍。青年母猪的超数排卵效果比经产母猪好， 这可能和青年母猪的排卵数相对较少有关。在进行胚胎移植时，， 供体和受体母畜的生殖周期， 一般应力求同期化。否则，移植的胚胎因生理环境不适而被排除掉。 在进行猪胚胎移植时， 受体猪较供体猪发情慢 1天或 2天为最好。 近年来， 许多人工合成内分泌激素开发成功，由单独应用孕酮发展到孕酮和雌激素联合应用，对猪施行超数排卵， 其主要目的是确保供胚母猪能够多排卵， 产生更多的胚胎供移植使用【2】。2 胚胎的采集当确认供卵猪发情之后，使其自然交配或人工授精。从发情开始 4—7天内采取受精卵。目前，胚胎采集及移植技术，包括外科手术，非外科，内窥镜3种方法。 2.1 外科手术法早在1982年就有人总结了手术法的经验，并且研究了影响其结果的各种因子。手术法和非手术法两者主要的差别是，前者需要对供体猪进行麻醉，在其腹部中线的一定区域切开一个切口，暴露出生殖道，在输卵管或者子宫角收集胚胎。对受体猪也需要麻醉和手术，并在和供体猪的生殖道的相同部位植入胚胎。实施手术时，青年母猪比经产母猪更耐受麻醉，也更容易操作。收集胚胎时，根据胚胎发育的阶段，使用少量的胚胎冲洗液，通过导管将胚胎收集在检胚皿中，经过形态学鉴定，将可用的胚胎移植给受体。据Hazele目”和Kemp等(1997)的报告，应用手术法受体母猪的平均妊娠率为75％一100％，窝产仔数为6.4—10.8头。据魏庆信等(2003)报告，供体母猪在发情周期第15—18 d使用PMsG 10IU/kg处理，72 h后用HCC l0IU/g处理，应用手术法从输卵管回收胚胎，湖北白猪、北京花猪可获得23枚胚胎，杜洛克母猪17枚胚胎，太湖猪32枚胚胎。受体母猪的妊娠率为80％～83％，窝产仔7.8头。据王前和牛树理等(2003)在江西的试验，供体为第4胎的长白母猪，自然发情后5—6 d后手术，在子宫角中部平均回收24枚(22—28枚)胚胎，移植8头杂种母猪，妊娠率为87.9％，平均窝产仔l0.8头(9.5一13头)，供体母猪在22 d后又重新发情配种，平均产仔10.5头，并没有影响本身的繁殖。我国山东省也报告了手术法移植成功的消息。外科手术一个重要环节就是麻醉，有一些