2017植物细胞工程基本技术.ppt

细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过 水平或 水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞 细胞器 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念： 按操作对象分 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 植物细胞工程 植物组织培养 （最基本） 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 基本技术 大多数植物都是由受精卵（有性生殖）发育而来的，那么由植物的体细胞如叶子、花瓣，甚至一粒花粉能发育成一棵完整的植株吗？为什么？应该如何操作？ 一、细胞的全能性 具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能,即每个细胞都具有全能性。 A、植物细胞动物细胞 B、受精卵生殖细胞体细胞; C、幼嫩组织细胞＞成熟组织细胞 1、概念： 2、细胞全能性大小: 规律：发育时间越早，细胞全能性越高，分裂能力越强，分化程度越低。 4、生物体内细胞并没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织器官的原因： 3、细胞具有全能性的原因: 生物体的每一个细胞都含有该物种个体生长发育所需要的全套基因。. 细胞中的基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。 怎样才能由一块组织通过培养得到一株完整植株,应该如何操作? 科学家利用菊花花瓣培养的菊花 1.概念： 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 二、植物组织培养技术——（无性繁殖） 2.原理：植物体细胞具有全能性 3、过程： 离体的植物组织、器官或细胞（外植体，消毒） 脱分化 无菌接种、诱导（一定的营养、植物激素、避光） 愈伤组织 再分化 试管苗 移栽大田 脱分化 再分化 胚状体或丛芽（具生根芽能力） 二、植物组织培养技术——（无性繁殖） （含有不同激素的分化培养基，需光） （1）愈伤组织： 排列疏松、高度液泡化而无定形状的薄壁细胞。无叶绿体，蔗糖供能，代谢类型为异养需氧型，进行有丝分裂。 （2）植物细胞的脱分化： （3）植物细胞的再分化： 就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，又称去分化。实质是提高细胞的全能性过程，结果是形成愈伤组织 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化形成胚状体或丛芽的过程。 （避光） （需光，自养需氧型） （4）决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？ 植物激素的种类和比例。 生长素用量 细胞分裂素用量 ①适中：诱导愈伤组织 ②高：利于根的分化、抑制芽的形成（胚状体） ③低：利于芽的分化、抑制根的形成（丛芽） a.离体、无菌操作； b.适宜的营养 c.生长素/细胞分裂素比例或主或低诱导生根或生芽 d.光照 a.离体、无菌操作；b.适宜的营养；c.生长素/细胞分裂素比例适中 d.避光 需要条件 有根、芽 排列疏松、高度液泡化的簿壁细胞 形成体特点 愈伤组织 幼苗 外植体 愈伤组织 过程 再分化 脱分化 比较内容 （5）两个阶段：脱分化和再分化 4、植物细胞表现出全能性的条件： ?离体（前提） ?一定的营养物质（蔗糖、水和无机机盐等）、植物激素（细胞分裂素、生长素）。 ?适宜的温度、pH、无菌、光照的控制等外界条件 试管苗大规模培养 1、在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？ 无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键。原因是防止杂菌污染，杂菌繁殖快，会和培养物争夺营养和空间，并产生代谢废物毒害培养物。 (P35) 2、为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分（如茎、叶、花）也能培养成小植株吗？ 因为这部分容易诱导形成愈伤组织；胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也能培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。 外植体的选取：生长旺盛的幼嫩组织（全能性高、分裂能力强、分化程度低），易诱导脱分化和再分化。 外植体 愈伤组织 胚状体或丛芽 试管苗 脱分化 再分化 植物组织培养的过程 （离体的,已分化组织或细胞） 幼芽或幼根？ 条件？ 优点？ 特点？ 繁殖速度快 不受季节限制 工厂化生产 . . . ①适宜温度、 pH、避光、无菌环境。 ②适宜的营养和植物激素 高度液泡化、排列疏松、无规则的薄壁细胞。无叶绿体。 分化程度低去分化较