敌百虫的药理实验.pptVIP

敌百虫半数致死量的测定 沈阳药科大学 药理教研室 Contents 目的 了解药物半数致死量(LD50)测定的意义、原理，掌握半数致死量的测定方法和计算过程。 掌握简化机率单位法的计算方法 了解急性毒性实验的相关内容及新药安全性评价的内容 实验材料 实验方法 实验结果和统计 举例 举例 实验结果和统计 用四个剂量时 LDK=Log-1 SLDK= LDK的可信限 = LDK±1.96SLDK (P =0.95) = LDK±2.58SLDK (P =0.99) LDK的可信限率 = 1.96SLDK/LDK(P =0.95) = 2.58SLDK/LDK(P =0.99) 举例 讨论 结论 LD50=720.44mg/kg SLD50=38.87mg/kg LD50的可信限是（644.25，796.63） LD50的可信限率是10.5%. 沈阳药科大学 原理 LD50是指使一群体动物中半数死亡的剂量，由 于实验动物的抽样误差，药物的致死量对数值大多在 50％质反应的上下呈正态分布。在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈 S 型曲线，S 型曲线的两端处较平，而在 50％质反应处曲线斜率最大，因此这里的药物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能比较准确地反映药物毒性的大小,是评价药物优劣的重要参数。 因此，通过测定LD50可以了解药物单次给药或短时间内多次给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度，为临床安全用药及监测提供一定的参考. 半数致死量的测定方法 动物均衡随机分组并标记 * 沈阳药科大学 * Determination of Drug Median Lethal Dose(LD50) 1 目的和原理 2 实验材料 3 实验方法 4 实验结果和统计 5 讨论和结论 昆明种小鼠，体重18g-22g,雌雄各半 注射器，鼠笼，天平 实验药品 实验方法 5%敌百虫溶液，苦味酸溶液 简化机率单位法 实验对象 实验器材 step2 step1 预实验 正式实验 实验方法 探索剂量范围： 先找出 100%及 0%死亡的剂量，此即上下限剂量（Dm 及 Dn）。对于无毒性参考资料的药物，一般先配制最大浓度药剂，然后按等比关系（如2：1）稀释成多个剂量。方法是先取出小鼠12-15只，以3只为一组，分为4-5组, 按估计量（根据经验或文献资料定出）腹腔注射敌百虫，观察出现的症状并记录死亡的动物数，如 3只小鼠全死则降低剂量一半 ，如全不死则增加剂量一倍，如部分死亡，则按 2：1 的比例向上、向下调整剂量，由此找出引起10%和90%死亡剂量的所在范围。 在预备实验所获得的10%和90%致死量的范围内，选用几个等比级剂量， 0.10mL/10g、 0.12mL/10g、 0.14mL/10g、 0.17mL/10g、 0.20mL/10g 、 0.24mL/10g （相邻剂量之间的比例一般为1：0.7 ～1：0.85），使一半组数死亡率在10% ～ 50%之间，另一半组数的死亡率在50% ～ 90%之间， 各组动物数应相等，一般每组可用10 ～ 20只，动物的体重和性别要均匀分配。完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。给药后观察并记录中毒症状，60分钟后清点各组动物的死亡数，计算敌百虫的LD50、LD50的可信限和可信限率。 0.379 0.612 0.615 0.54 0.395 权重 系数We 3.03 6.18 88 7 2.903 800 5 4.90 5.33 63 5 2.833 680 4 4.92 4.69 38 3 2.748 560 3 4.32 4.33 25 2 2.681 480 2 3.16 3.87 13 1 2.602 400 1 权重W 机率 单位Y 死亡率 P 动物 死亡数 对数 剂量 X 给药 剂量 D(mg/kg) 组别 将给药剂量、动物死亡数及死亡率等填入上表，然后根据下述公式计算LD50、LD50的可信限和可信限率。 死亡率% ∑致死量 8 7 6 5 4 3 2 1 0.24 mL/10g 0.20 mL/10g 0.17 mL/10g 0.14 mL/10g 0.12 mL/10g 0.1 mL/10g 组数 预实验结束后，确定6个剂量组，如下表所示。将96只小鼠分为6组，每组16只。称重标记后，腹腔给药，观察并记录中毒症状，60分钟后清点各组动物的死亡数，计算死亡率如下： 0.5 0.57 0.637 0.5 权重 系数Wc 7.00 5.81 79% 11 3.08 1200 4 7.98 5.55 71% 10 3.00 1000 3 8.9