IgY牙膏对远缘链球菌黏附定居影响.pdfVIP

山两医科人学硕I：学位论文 —1上．—j一 刖 吾 龋病是人类最常见的口腔疾病，是世界卫生组织列为人类需重点防治的三大疾病之一。 目前龋病的病因学说以四联因素学说为主，长期以来，变形链球菌(简称变链)因其在人 类口腔中检出率高、致龋力强而备受关注。但近年来的一些研究表明，尽管远缘链球菌(简 称远链)在人群中的检出率不及变链，但与变链相比，它具有更强的致龋潜力，对龋病的 发生和活跃性可能更为重要川。 动物实验表明，远缘链球菌表现出较高的致龋潜力，不仅能介导点隙窝沟龋，也能介 导平滑面龋。在人类，Hirose住1等发现远链组儿章龋坏牙和龋坏牙面增多的数目显著高于 变链组。他们认为与变链相比，唾液中远链的水平比变链的水平更能预测龋齿活动性。 龋病作为一种病原体明确的感染性疾病，目前有不少学者在免疫防龋方面做了大量研 究，并取得一系列重大的成果。研究结果表明：主动免疫和被动免疫防龋均是可靠的、治 本的有效技术。但由于主动免疫使体内防龋疫苗产生的抗体可与心脏组织发生反应，产生 免疫复合物介导的疾病(如心内膜炎)，因而主动免疫尚未在人类中开展应用。而被动免 疫是体内直接输入抗变链菌抗体(免疫球蛋白)，从而达到防龋的目的，避免了主动免疫 所存在的问题，因此成为当今防龋研究的热点口1。 通过被动免疫技术，各国学者已制备得到4种抗龋牙抗体：①抗龋牙单抗；②抗龋牙 血清抗体：③抗龋牙牛奶抗体；④抗龋牙鸡蛋黄抗体。其中，鸡蛋黄抗体IgY具有制备方 便、特异性高、稳定性好等特点，日益受到国内外学者的关注，并且通过国内外学者的证 实鸡蛋黄抗体IgY能有效抑制变形链球菌的黏附率，降低龋病的发生率。 近年来，抗变链IgY的开发和应用受到普遍关注。用IgY制成漱口水、喷剂应用于临 床预防口腔龋病、牙周炎和治疗急性咽炎均获得良好效果。陈洪等用IgV牙膏处理体外培 养的变形链球菌，电镜观察发现IgY牙膏能改变变链菌的超微结构，使细菌表面的荚膜破 坏，影响细菌的黏附能力H1。现阶段的研究结果表明抗变链IgY能抑制变形链球菌和远缘 链球菌与牙齿表面的黏附，制成牙膏后对变形链球菌的黏附亦具有抑制作用，但对远缘链 球菌的黏附是否也具有抑制作用，还需要我们完善研究。 本实验采用体外抑菌实验来研究IgY牙膏对远缘链球菌的黏附抑制率，并通过透射电 镜观察，从细菌形态学方面的变化探讨其抑菌机理，取得肯定结果后向动物模型推进，为 IgY牙膏应用于临床防龋进一步提供依据。 山两医科人学硕l：学位论史 材料与方法 实验一：细菌实验 1．1实验药物 配制溶液，离心取上清。溶液用0．22um滤器过滤除菌。 1．2细菌与培养基 四川大学口腔生物医 学工程教育部重点实验室提供 乳酪消化大豆胨肉汤(TSB) 青岛海博生物技术有限公司 牛心脑浸液琼脂(BHI琼脂) 青岛海博生物技术有限公司 轻唾琼脂培养基(MSB琼脂) 青岛海博生物技术有限公司 1．3主要设备与试剂 GL20A全自动高速离心机 湖南湘仪 SW—CJ一1F净化工作台 苏州净化设备有限公司 漩涡振荡器 北京大学医学仪器厂 721分光光度计 上海第三分析仪器厂 0．22um微孔滤膜除菌器 美国 JY2002电子天平 上海精密科学仪器有限公司 光学显微镜 同本 细菌生化鉴定管