电针对大鼠脑缺血再灌注后神经发生及神经功能重建影响.pdf

式细胞仪(Flow Cytometry,FCM)检测脑内新生细胞。 于脑缺血2h再灌注7d后取材，应用Westemblot检测大鼠海马和纹状体内Nestin蛋白 的表达。 取材，制备冰冻切片，进行如下检测： (1)免疫／荧光免疫组织化学单色标记方法检测BrdU阳性细胞：显微镜／激光共聚 焦显微镜下观察新生细胞的表达及表达部位。 激光共聚焦显微镜下观察新生胶质细胞的表达及表达部位。 激光共聚焦显微镜下观察新生神经细胞的表达及表达部位。 (4)免疫组织化学双色标记方法检测BrdU+Ach阳性细胞：显微镜下观察新生神 经细胞有无功能。 伏期(escapelatency,EL)。 结果 1．随脑缺血时间延长大鼠脑梗塞面积增大；脑缺血45min再灌注24h、脑缺血lh 1h减少。 fluorescence MFI 峰，平均荧光强度(mean +EA组(362．874-16．08)MFI明显增加(尸0．01)。 蛋白的表达较UR组明显升高。 4．新生细胞表达 (1)各组脑内均有新生细胞，主要集中于侧脑室区； 2 (2)缺血损伤侧侧脑室区、海马CAl区、纹状体、蛛网膜下腔及额顶叶皮层新生 细胞有较多表达； (3)损伤侧纹状体的新生细胞表达：与sham组比较，I／R组新生细胞明显增多(P O．01)，：I瓜+EA组新生细胞较I／R组新生细胞明显增多(尸O．01)； (4)新生细胞有少量GFAP表达阳性，主要集中于侧脑室区、纹状体与大脑皮层， I／R+EA组较I／R组表达增加； 脑皮层部位；sham组与FR组未发现NF200表达阳性； (6)I瓜+EA组新生细胞少量Ach表达阳性，主要集中于纹状体部位。 脑缺血再灌注后2w开始下降，脑缺血再灌注后lm降至最低。 结论 1．急性局灶性脑缺血再灌注可诱导大鼠脑内新生细胞增殖。 2．电针干预可诱导脑内新生细胞增殖，并促进新生细胞分化为胶质细胞与神经细 胞；电针干预后少量新生神经细胞已经具有分泌Ach的活性和功能。 3．电针干预可促进脑缺血再灌注后大鼠神经功能的恢复。 关键词：MCAO；针刺；脑缺血再灌注；BrdU；神经发生；神经干细胞； 3 THE ELECTROACUPUNCTURETOWARDS INFLUENCE0N NEUROGENESISANDNEUROFUNCTIONAL AFTERCEREBRALISCHENⅡAREPERFUSION Li Postgraduate：Jinguo Tutor：Prof．BaiBo Prof．DumaYaokui Specialty：Neurobiology ABSTRACT objective restorationof To theeffectof and investigate electroacupuncture(EA)onneurogenesis in discussthe nervefunctiontheratsafteracutefocalcerebral functionand mechanismof inbrainischemicSOasto possible electroacupuncture in