双氢青蒿素对人食管癌细胞TE-13体外作用及其机制实验的研究.pdfVIP

中文摘要 双氢青蒿素对人食管癌细胞TE．13的体外作用 及其机制的的实验研究 摘 要 一，我国属于食管癌病发率较高的国家，近年来其发病率和病死率均逐年 增高。目前食管癌的主要治疗模式是包括手术、化疗、放疗及生物治疗为 主的综合治疗。因为该病早期症状不明显，缺乏特异性的表现，容易为忽 视，很多患者确诊时已经属于中晚期，预后很差。因而寻求一种有效的治 疗方法，对于改善食管癌患者的生活质量及延长生存时间有着十分重要的 意义。近年来，国内外很多学者通过体内外实验研究发现青蒿素的衍生物 传统化疗药物治疗并不具备的一些优良的特点，因此作为一种具有广阔发 展前景的抗癌治疗药物，日益引起广大学者的广泛关注，但目前国内外有 关DHA对人食管癌的影响的文献报道较少见。本实验通过体外实验研究 DHA对人食管癌细胞株TE．13的增殖抑制作用和对细胞周期和凋亡以及 株TE．13细胞的作用及其相关机制，从而为食管癌的中医中药治疗提供相 应的理论依据。 方法： 1细胞培养后，应用普通光学显微镜观察DHA作用于人食管癌细胞株 TE．13后细胞的形态学变化。 2不同浓度的DHA作用于人食管癌m13细胞后，应用四甲基偶氮唑 蓝(memyltIliazolyl 增殖的影响。 癌细胞株1E．13凋亡率的影响o 4应用流式细胞技术检测DHA对人食管癌细胞TE．13细胞周期分布 影响。 中文摘要 5应用免疫细胞化学(immunocytochemis．时，IC)方法定性检测DHA作 表达变化。 结果： 1DHA对TE．13细胞形态的影响 普通光学显微镜下观察未经药物处理的1E．13细胞贴壁生长，分布均 匀，形态呈菱形或多边形，大小一致，细胞透明，形态饱满，胞体折光性 好。而经过DHA处理48h后的实验组细胞形态发生明显的变化，细胞数 目减少，体积缩小，细胞胞浆中出现空泡，细胞核固缩，脱落细胞数量明 显增加，胞体折光性减弱。 2DHA对TE．13细胞增殖的抑制作用 M丌比色法显示，不同浓度DHA对1E．13细胞有明显的体外增殖抑 不同程度的升高，与对照组相比，差异具有统计学意义(po．05)。并且随 着药物浓度的不断增加、作用时间的不断延长，OD值逐渐下降，抑制率 逐渐升高。由此可见，DHA对TE．13细胞的增殖抑制作用呈现明显的剂 量．时间效应关系。 3DHA对1E．13细胞凋亡率的影响 流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示，DI认可诱导1E．13细胞凋亡。 典型的亚二倍体凋亡峰，随着DHA浓度增大呈明显的升高趋势，低、中、 高剂量加药组的凋亡百分率分别为：8．643％=加．126％、18．606％如．776％、 29．026乡钍O．730％，统计后提示各处理组较对照组有显著性统计学意义 (po．05)。 4DHA对TE．13细胞周期分布的影响 流式细胞仪检测细胞周期结果提示，DHA可阻滞TE．13细胞周期于 Go／G1期，该作用在各加药组有明显的剂量依赖性。应用不同浓度DHA 组与对照组相比，伽1期细胞呈增多趋势，G2／M及S期细胞呈减少 趋势，统计提示较对照组及药物组均有统计学意义(P0．05)。 中文摘要 的影响。 分比以及阳性细胞染色程度两方面分析，加药组SuⅣiviIl蛋白表达值(IHS 值)随药物浓度增加，逐渐降低，各加药组和对照组相比有显著性差异 各加药组和对照组相比有显著性差异Q0．01)。 结论： 1 M，兀’实验证实在一定浓度范围内，Dl认具有抑制人食管癌细胞株 TE．13增殖的作用，并呈现明显的剂量一时间依赖关系。 2 期，并在一定浓度范围内呈时间．剂量依赖性。 3 蛋白表达水平有关。 英文摘要 ofEf3fectsandMechanismsof Study onHumancarcinoma CeULineTE一13 of鹤ophaguS