EnSpire说明.pdf

EnSpire dispenser 中文操作说明 1. 确保电源处于通电状态。 2. 打开显示器，打开电脑（位于EnSpire 仪器右后侧）。 3. 打开EnSpire 仪器主机 （开关机键位于EnSpire 左后侧）。 4. 在Windows 桌面双击EnSpire Manager 图标（仪器初始化、操作软件与仪器连接并 自检）。 5. EnSpire 软件显示状态栏Idle 状态时表明仪器自检结束，处于available 状态。 软件界面如下： 带Lock 标志的protocol 为厂家预置模板，选中点击Run 即可直接运行； Valid 下方绿色小方块表示该protocol 为有效程序，其各光学部件及设定满足运行 要求，否则需查明原因或致电相关人员。 6. 检测程序创建 （Create ）： 点击Create protocols，该界面激活，创建模式包括Copy selected 和Create new 两 种： a. 选中所需检测技术，如荧光强度（FI）Fluorescence，选中Fluorescein 以其为模 板，点击Copy seleceted，复制后软件界面自动转入编辑窗口（Edit protocols），名称为copy of …… b. 编辑界面包括： 样品排布（Plate）：其中可设置样品类型（select samples to draw on the plate ） 为空白Blank，样品unknown，标准standard 等，右侧可设置重复 （Replicates ），Sample index 显示编码，例如设置标准品双孔重复，则 Replicates 为2，Sample index 从1 开始，依次编为1、1，2、2，……；注：空白 blank 没有编码。右上侧view 为调节视窗大小，size to fit 为默认最佳大小，也 可根据需要自己选择。 检测参数及步骤（Measurement）：界面如下，包括Available Operations、 sequence 和repeated sequence、以及右侧具体参数三个小窗口。 Measurements 下包括单一检测Single （适用于Abs、Fl、Lum、TRF 、Alpha 检 测），板孔扫描well area scan （适用于Abs、Fl、Lum 和TRF 方法，该模式主要 用于cell based assay，如贴壁细胞实验，扫描板孔不同位置的信号），on-the-fly 模式只用于光吸收Abs 检测（其速度更快且不能添加其他检测步骤），光谱扫 描Spectrum scan （包括ABS 和FI，即吸收谱、激发或发射谱扫描）。 other operations 则包括振荡shake （线型、圆形或八字形模式）、时间延迟 delay （可用于慢速动力学检测）、温控temperature （RT+2℃，最高可达 65℃，注意：不能制冷）、加样dispense （可用于快速反应实验如flash 型发光 实验、离子通道如钙离子检测等）。 在Abs 及FI 模式下，除波长外其余可采用默认设置，如下图右侧参数栏：FI 检 测模式为顶读（也可根据实验需要选择底读bottom），激发发射波长分别为 475nm 和512nm，检测高度为9.5mm，number of flashes 为500 ；注：number of flashes 为灯的闪烁次数，数值越大表明闪烁次数越多，检测速度会降低，该 参数一般默认即可，也可根据需要调节。 Sequence 检测方式为整板顺序检测模式，按照用户设定的操作从上到下依次执 行；如下图所示仪器操作顺序为先加液、再振荡、最后检测FI。 Repeated sequence 主要用于动力学重复检测，包括慢速动力学by plates 和快速 动力学检测by one well 模式，或者某几孔重复检测by n wells 模式。 By plate 模式：可实现整板多次读取，在参数栏输入检测次数number of repeats 和每次检测间隔的时间start repeats each （数值为０表示连续检测）。 By one well 模式：单孔检测，如下图所示，第一孔先加液再检测，然后第二孔 加液并检测，直至最后一孔检测完毕；可根据需要添加更多操