MEPHyperCel疏水电荷诱导层析-改变传统疏水层析.pdf

层析介质的新选择 混合模式层析-MEP，HEA PPA Jun23，Shanghai Filtration. Separation. Solution. SM Disclaimer  This presentation is the Confidential work product of Pall Corporation and no portion of this presentation may be copied, published, performed, or redistributed without the express written authority of a Pall corporate officer. © Pall Corporation 2010 混合机制层析需要不断优化达到特有的结果  如果你想得到你之前没有得到的东西 ， 你就得尝试你之前没有做过的事情 Arthur Andrews © Pall Corporation 2010 混合模式层析  利用多种不同的蛋白配基和分子之间的相互作用吸附目标 产物或杂质  在传统的层析方法（IEX，HIC）失败或成本较高（亲合 ）的时候，混合模式层析是另外一种可能的选择， 可用 于捕获，或中度/精细纯化  配基的形式多样合成的， 羟基磷灰石的，染料和仿生 态的配基  越来越多的获得行业的认可 © Pall Corporation 2010 1903: 羟基磷灰石一类混合模式层析的介质 M.S. Tswett Ca10(PO4)6(OH)2  氨基  羧基  金属亲合 (典型的螯合)被离子交换和分子筛调节  典型离子交换  比离子交换的结合力强15 – 60倍 © Pall Corporation 2010 1974: 以染料为配基的层析介质  染料与NAD 或 NADP 类似 物的特异立体识别  静电作用  疏水作用  电子交换  Pall product: Blue Trisacryl® （纯化IFN或血液制品如转铁 蛋白和血液类似物） © Pall Corporation 2010 MEP, HEA, PPA HyperCel™ 混合机制层析介质 Filtration. Separation. Solution. SM 疏水电荷诱导层析意味什么？  疏水电荷诱导层析是相对最近兴起的层析分离技术，因为特有的选 择性和可放大特性被行业越来越多的接受  MEP HyperCel介质的操作原理是疏水电荷诱导，基于合成配基的双 模式pH依赖行为  4-MEP配基在中性条件下不带电荷疏水结合目标分子，在流动相 降低pH的条件下诱导电荷的产生洗脱结合蛋白 © Pall Corporation 2010 传统疏水作用层析 © Pall Corporation 2010 混合模式疏水电荷诱导层析（HCIC）  在吸附pH下配基不带电荷  不需要加盐或仅加少量的盐即能促进吸附  解离是在降低流动相pH的条件下进行的 Adsorption Desorption