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p16及PCNA在胶质细胞瘤中表达及意义 　【关键词】 胶质细胞瘤 【摘要】 目的 了解胶质细胞瘤中p16和PCNA表达概况，探寻p16和PCNA在胶质细胞瘤及正常脑组织中的表达差异，初步分析其临床意义。方法 通过免疫组织化学法检测胶质细胞瘤及正常脑组织中基因p16和PCNA的表达。结果 胶质细胞瘤组织中p16的阳性表达率为52.5%，正常脑组织中p16的阳性表达率为100%，两者比较差异有非常显著性(P＜0.001)。p16的阳性表达与胶质细胞瘤分化有关(P＜0.01)。PCNA在胶质细胞瘤中的高表达率为80%，正常脑组织中未见高表达率。两者比较差异有非常显著性(P＜0.01)。PCNA的高表达与胶质细胞瘤分化有关(P＜0.05)。结论 基因p16和PCNA表达异常是胶质细胞瘤产生的机制之一，与胶质细胞瘤的发生及发展有关。 　　【关键词】 胶质细胞瘤；基因；p16；PCNA；免疫组织化学法 　　p16 and PCNA expression profiles in glioma and its clinical significance 　　【Abstract】 Objective To investigate the expression of gene p16 and PCNA and to demonstrate their expression difference in glioma and in normal brain tissue and to evaluate its clinical significance.Methods Immunohistochemistry methods were used to analyze the expression of PCNA and p16 in glioma and in normal brain tissue.Results The rate of p16 positive expression in normal brain tissue and glioma were 100% and 52.5% respectively.There was significant difference between brain normal tissue and glioma　(P＜0.001),and it was related to the differentiation of glioma.PCNA was higher expression in glioma compared with normal brain tissue(P＜0.001)，and it was related to the differentiation of glioma (P＜0.05).Conclusion p16 and mutation PCNA are involved mainly in glioma carcinogenesis. 　　【Key words】 glioma;gene;p16;PCNA;immunohistochemistry 人脑胶质细胞瘤是威胁人类健康的恶性肿瘤，在我国发病率及死亡率呈上升趋势。此瘤中有多种癌基因激活、抑癌基因失活及其蛋白改变［1］。本研究利用免疫组化检测胶质细胞瘤组织中p16和PCNA的表达，探讨它与胶质细胞瘤发生发展及临床病理因素的关系。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 随机收集我院神经外科2002年1月～2004年10月胶质细胞瘤手术切除组织40例，男26例，女14例。年龄18～62岁，平均39.7岁。胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级18例，Ⅲ～Ⅳ级22例。所有患者在手术后取肿瘤组织用福尔马林固定，石蜡包埋，4μm连续切片，分别做HE及免疫组化染色。所有患者术前未接受过任何放疗、化疗及免疫治疗，术后均经常规组织病理证实。同时收集40例正常脑组织作为对照，取材于外伤、蛛网膜囊肿等非肿瘤患者非功能区脑组织。 　　1.2 试剂来源 S-P免疫组化试剂盒和p16及PCNA抗体为上海基因有限公司产品。 　　1.3 实验方法 免疫组织化学法按试剂盒说明书操作，抗原修复采用水煮沸法，用动物血清代替一抗作为阴性对照，用扁桃体组织作为p16阳性对照，用胃癌组织作为PCNA阳性对照。 　　1.4 阳性结果判断 p16主要在细胞核或在胞膜、胞质中出现棕黄色颗粒为阳性，PCNA组织切片以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。用半定量方法随机选择10个高倍视野计数，p16计算阳性细胞百分比≤10%为(-)，11%～25%为(+)，26%～50%为(++)，＞50%为(+++)。PCNA用增殖指数表示，即PCNA阳性细胞占肿瘤细胞的百分率，并把它分为4级：Ⅰ级为1%～25%