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天山大黄黄酮提取方法比较 　【关键词】 天山大黄 　　摘要: 目的: 从天山大黄中提取总黄酮并测定其含量。 方法: 运用超声技术连续提取天山大黄总黄酮，用比色法测定总黄酮含量。 结果: 测得天山大黄中总黄酮含量0.357%，平均回收率为98.86%，RSD=1.35%（n=:6）。 结论: 首次运用超声技术从天山大黄中连续提取总黄酮、多糖，速度加快，收率提高。 关键词: 超声提取; 天山大黄; 总黄酮; 含量测定 　　Abstract: Chromocor were extracted from Rheum wittrochii L.by ultrasonic method，and the content was determination.Chromocor were extracted by ultrasonic method，and the content was determined by spectrophotometer.The chromocor content of Rheum wittrochii L.is0.357%，recovery rate is98.86%.It is the first time to extract chromocor from Rheum wittrochii L.by ultrasonic method，Ultrasonic extraction was a better method for chromocor of Rheum wittrochii L. Key words: ultrasonic extraction; Rheum wittrochii L.; Chromocor; Content determination 　　天山大黄（Rheum wittrochii L.），多年生草本，主要生长在天山山脉，为新疆特有大黄品种。维吾尔语发音“热万”。维吾尔族民间用于治疗血小板减少症、闭经、痢疾、通淋不利等症［1］ 。目前，对天山大黄蒽醌成分研究很多，而对其黄酮研究较少。药理研究表明，天山大黄黄酮具有降血脂、改善心肌功能的作用 ［2］ 。为正确评价天山大黄的药材质量，我们首次运用超声技术从天山大黄中连续提取总黄酮 ［3］ 并测定其含量，结果令人满意。 　　1 仪器、试剂及样品 　　1.1 仪器 岛津UV-2401PC紫外可见分光光度计，DL-360超声波仪（35kHz，浙江象山县石浦海天电子仪器厂），TG328B分析天平，DZKW-C电子恒温水浴（北京光明医疗仪器厂），R-201旋转蒸发器（上海申胜生物技术有限公司），索氏提取器。 　　 　　1.2 材料与试剂 对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所。其余试剂均为分析纯。天山大黄:采自天山北坡新疆沙湾县林场内，经石河子大学生物学院何敬琨教授鉴定为（Rheum wittrochii L.）。秋后采挖，洗净，切片晾干，破碎后备用。取天山大黄粉末0.5g，加甲醇5ml振摇后放置30min，滤过。取滤液点在滤纸上，在紫外灯下（365nm）处观察，天山大黄显亮紫色［1］ 。 　　2 天山大黄中黄酮提取与含量测定 　　2.1 样品溶液制备 　　取天山大黄样粉约2g，精密称定，置索氏提取器中，用石油醚（60～90℃）水浴回流脱脂2次（每次2h）。残渣挥干溶剂后，置锥形瓶中，加85%的乙醇50ml，浸泡12h，分别超声提取1，2，3次，每次20，30，40min。过滤，另用少量85%乙醇多次洗涤滤渣，并入提取液，并转入100ml容量瓶中，用85%乙醇定容，摇匀，即得测总黄酮的天山大黄样品液。按标准曲线的制定法，确定提取2次，30min/次吸收度最大。 　　2.2 总黄酮含量测定 　　2.2.1 标准曲线的制定 精密称取120℃干燥恒重的芦丁标准品10mg，加85%乙醇溶解，定容至50ml容量瓶中，摇匀，制成浓度为0.2mg/ml的标准品溶液。分别取标准品溶液0.0，0.2，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0ml于10ml容量瓶中，加5%亚硝酸钠0.4ml，放置6min后，加10%硝酸铝0.4ml，放置6min，再加4%的氢氧化钠4ml，加水至刻度，摇匀，放置15min，进行全波长扫描，在510nm处均有最大吸收。以测定结果计算得直线方程C=79.23A-0.459，r=0.9981。在4～80μg/ml的范围内，浓度与吸收度有良好的线性关系。 　 　　2.2.2 样品含量测定 　　精密吸取供试品溶液1.0ml，置10ml容量瓶中，按标准曲线的制定项下相同的方法显色测定。通过标准曲线，计算出样品总黄酮的含量，见表1。 2.2.3 定性分析 　　2.2.3.1 还原反应，将样品溶于乙醇，加入少量镁粉振摇，滴加几滴浓