病毒性肝炎患者血清NO浓度及TNF-α、IL-1β水平关系.docVIP

病毒性肝炎患者血清NO浓度及TNF-α、IL-1β水平关系 　【摘要】 目的 探讨病毒性肝炎患者血清中一氧化氮（NO）浓度、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的含量水平及它们在病毒性肝炎病理机制中的作用。方法 用硝酸还原酶法测定NO浓度，采用双抗体夹心ELISA法测定TNF-α浓度和IL-1β浓度，包括丙肝患者、乙肝大三阳（HBsAg阳性、HBeAg阳性、HBcAb阳性）患者、乙肝小三阳（HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性）患者和健康对照组。结果 血清中NO、TNF-α、IL-1β的水平，丙肝患者、大三阳、小三阳患者与健康对照组比较差异有统计学意义；NO、TNF-α含量，大、小三阳患者差异有统计学意义；IL-1β两者差异无统计学意义。结论 NO、TNF-α、IL-1β可能参与了病毒性肝炎的炎性损伤过程。 【关键词】 病毒性肝炎患者；一氧化氮；肿瘤坏死因子；白细胞介素 ［Abstract］ Objective To study the level of NO，TNF-α and IL-1β in serum of patients with virtus hepatitis and its clinical significance.Methods NO，TNF-α and IL-1β were determined by biochemical and immunological method.Patients were divided into 4 groups according to hepatitis markers determined by ELISA:HCV（+）（group A）；HBsAg（+），HBeAg（+），HBsAg（+）（group B）；HBsAg（+），HBeAb（+），HBcAb（+）（group C）；individuals with negative （control group）.Results The level of serum NO，TNF-α and IL-1β of patients in group A，B and C were significantly higher than that in control group.The difference of the levels of NO，TNF-α and IL-1β was not significant between group B and group C.Conclusion NO，TNF-α and IL-1β may participate in liver damage of virtus hepatis. ［Key words］ virtus hepatitis；nitros oxide；tumor necrosis factor；interleukin 病毒性肝炎是一种感染人数众多，危害极大的传染性疾病，病毒对肝脏的损伤机制错综复杂，本文检测病毒性肝炎患者血清中TNF-α、IL-1β和NO的水平，通过对这些数据的分析来探讨它们在病毒性肝炎病理机制中的作用。 1 资料与方法 1.1 一般资料 我院2005年1～11月收治129例病毒性肝炎患者（包括长宁区中心医院同期25例丙肝患者），男63例，女66例，年龄18～85岁，平均51岁，其中丙肝患者43例，乙肝大三阳患者42例，乙肝小三阳患者44例；静脉采血3 ml，分离血清冰冻备用。设健康对照组43例，男22例，女21例，平均年龄45岁，为我院体检三对半、丙肝指标皆为阴性的健康人群，静脉采血3 ml，分离血清备用。 1.2 方法和步骤 以晶美微生物工程（北京）有限公司提供的一氧化氮（NO）试剂盒（酶法）检测患者血清中的NO的含量。操作步骤如下：（1）准确吸取待测血清0.1 ml及标准品（KNO3标准100.0 μml/L）、双蒸水（作为空白管），再加入磷酸盐缓冲液、硝酸还原酶各0.1 ml，轻轻混匀，37 ℃水浴1 h。（2）再加入显色剂混匀，室温放置10 min。（3）比色，530 mm波长，以双蒸水空白调零，读取各管吸光度值。人血清NO浓度为50～110 μml/L。人TNF-α ELISA试剂盒，人IL-1β ELISA试剂盒检测患者血清中的肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）。操作步骤如下：（1）除空白孔外，分别将标本或不同浓度标准品（100 μml/孔）加入相应孔中，用封板胶封住反应孔，37 ℃孵箱孵育90 min，洗板。（2）除空白孔外，加入生物素抗体工作液（100 μl/孔）封住板孔，37 ℃孵箱孵育60 min，洗板。（3）加入酶结合物工作液（100 μl/孔）封住板孔，