紫杉醇对涎腺腺样囊性癌实验性肺转移抑制作用.docVIP

紫杉醇对涎腺腺样囊性癌实验性肺转移抑制作用 　【摘要】 目的观察紫杉醇对人高转移性涎腺腺样囊性癌细胞(ACCM)在裸鼠体内肺转移的抑制作用。方法22只裸鼠,尾静脉注射接种ACCM细胞建立实验性肺转移模型,随机分为紫杉醇组和对照组。紫杉醇组于接种肿瘤细胞后第2 天起腹腔注射紫杉醇10 mg/kg,3 d注射1次,共10次;对照组同期腹腔注射等量溶剂。接种6周后处死实验动物。观察发生肿瘤肺转移的裸鼠数目,称体质量;解剖裸鼠肺脏,称质量;记录肺转移灶数目。结果对照组和紫杉醇组相比,肺转移率100% vs 54.54%,肺转移结节数(28.64±10.69) vs (15.17±4.83),转移肺湿质量(0.702±0.044)g vs (0.524±0.046)ｇ,2组比较差别均有统计学意义(Plt;0.05)。结论紫杉醇对ACCM细胞肺转移具有明显抑制作用。 【关键词】 癌 腺样囊性 紫杉醇 肺肿瘤 肿瘤转移 腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)是口腔颌面部常见的唾液腺恶性肿瘤。国内统计腺样囊性癌占唾液腺肿瘤的9.95%,占唾液腺恶性肿瘤的24%,居第2位[1]。其主要表现为侵袭性强,易发生远处转移,以肺转移多见。目前多采用手术扩大切除辅以放、化疗的综合治疗,但术后局部复发率高达42%,远处转移率可达32%[13]。目前,不少学者认为常用的化疗药物[如顺铂(DDP),5氟尿嘧啶(5FU),阿霉素等]控制ACC转移的疗效不佳,因此选择特异性化疗药物始终是ACC治疗和抗转移的目标之一[1]。紫杉醇(palitaxel)是一种由红豆杉属植物的树皮提取的化合物,是近年来研究开发的一类化学结构新颖、作用机制独特的新型抗肿瘤药,具有抗肿瘤侵袭和转移的作用。已证实对晚期卵巢肿瘤、转移性乳腺肿瘤有明显疗效。笔者通过建立无胸腺裸小鼠实验性ACC肺转移动物模型,观察紫杉醇对ACC肺转移的抑制作用,了解紫杉醇动物体内抗ACCM细胞肺转移能力。 1材料和方法 1.1材料 1.1.1药品紫杉醇(泰素,美国百时美施贵宝公司),原包装注射液30 mg/mL,保存在-20 ℃冰箱,使用时取1 mL用生理盐水配制成相应浓度为0.2 mg/mL的工作液,4 ℃冰箱保存;小牛血清(美国Hyclone公司);RPMI 1640培养基干粉(美国Gibco公司)。 1.1.2动物雄性,BALB/C,nu/nu,无胸腺裸小鼠,SPF级,6~8周龄,体质量18~20 g,由中国科学院上海实验动物中心提供[动物合格证号:SCXK(沪)20020012],福建医科大学动物中心饲养,饲料、水、饲养笼、垫料均经高压无菌消毒,SPF条件下饲养,所有操作均在超净台上处理。22只裸鼠等质量随机分为紫杉醇组和生理盐水组(对照组)，体质量差别无统计学意义[(20.3±1.64)g vs (20.6±1.38)g]。 1.2方法 1.2.1细胞培养肺高转移人涎腺腺ACC细胞株(ACCM)由上海口腔医学研究所建株[4],由上海第二医科大学附属第九人民医院口腔颌面外科实验室提供。细胞培养在福建医科大学附属第一医院中心实验室进行。ACCM细胞在含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,37 ℃、体积分数为0.05的CO2条件下培养,每3~4天按1∶4~1∶5传代。 1.2.2ACCM细胞裸小鼠肺转移动物模型及药物用法(1)处于指数生长期的细胞经0.125%胰酶消化,吹打成单细胞悬液,细胞经1 000 r/min离心5 min,弃去上清,加入Hank’s液吹打后再离心,重复3次,用无血清RPMI 1640培养液稀释,调整细胞浓度为5×106 mL1备用;(2)裸鼠放入固定器中,在严格无菌条件下经尾静脉注入细胞悬液，每只0.2 mL(1×106个细胞);(3)细胞接种后第2天起,紫杉醇组每只按10 mg/kg紫杉醇腹腔给药,药物剂量参照文献[6]换算,3 d注射1次;对照组予同样体积的生理盐水,3 d注射1次,共10次,于接种后6周末断颈处死动物。 1.3观察指标给药期间观察裸鼠的一般情况,接种ACCM细胞6周后断颈处死,称量裸鼠体质量;解剖肺脏,清洗后电子天平称肺质量;压片计数法记录肺转移灶数目;中性福尔马林固定肺组织,常规石蜡切片,HE染色,进行组织病理学检查。 1.4统计学方法采用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析,结果设α=0.05。裸鼠体质量、肺质量、转移灶数目用方差不齐的t’检验,转移率用χ2检验。 2结果 2.1肺转移动物数、肺转移率、肺表面转移结节数及裸鼠肺质量两组比较,差别有统计学意义(Plt;0.05,表1)。 2.2一般情况实验前对照组体质量与紫杉醇组差别无统计学意义。用药期间,紫杉醇组