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腹内感染162例厌氧菌分离鉴定及药敏分析 　［摘要］ 目的 探讨212株厌氧菌在腹内感染中的分布情况，了解它们对10类抗生素的敏感性。方法 采用多种选择性培养基和厌氧手套箱法对162例腹内感染样本进行厌氧菌培养和鉴定。用布氏肉汤稀释法进行药敏试验。结果 162例标本检测出92份厌氧菌培养阳性，厌氧菌检出率56.7%。共分离各种厌氧菌212株，平均每份阳性标本2.2株，其中脆弱类杆菌113株（53.3%），其次是各种消化链球菌和梭杆菌。甲硝唑能抑制各类厌氧菌生长，万古霉素对革兰阳性厌氧菌有效，克林霉素比林可霉素对厌氧菌生长抑制作用强。结论 腹腔内感染属于内源性感染，厌氧菌分离率高，常以脆弱类杆菌为主。腹内感染常为多种细菌的混合感染，临床上治疗腹内感染采取联合用药，疗效最好。 　　［关键词］ 腹内感染；细菌学；厌氧菌；药敏试验 厌氧性细菌是一群在有氧条件下不能生长，必须在无氧条件下才能生长繁殖的细菌。绝大多数的厌氧菌均为体内正常菌群，广泛存在于皮肤、口腔、上呼吸道、肠道及泌尿道黏膜上，因而容易引起这些部位的内源性感染，约60%的临床感染有厌氧菌参与［1］，临床上许多疑为感染而常规细菌检验阴性的病例，很可能是厌氧菌感染，这些厌氧菌感染发病率和死亡率均较高，治疗方法又与需氧菌不同［2］。因此要提高临床上对感染性疾病的诊断率，就必须加强对厌氧菌的检验。现将我院2003~2005年对162例腹内感染病例标本进行厌氧菌培养鉴定及药物敏感结果报告如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 菌株来源 　　自2003年3月~2005年3月我院收治各类腹内感染病人，其中普外科急性阑尾炎患者67例，腹内脓肿5例及各种原因引起的弥漫性腹膜炎32例，肝胆外科胆道感染64例，全部病例均在剖腹后，立即用无菌注射器抽取脓液、胆汁或炎性渗出液1~2 ml，排尽气泡，把针头插上无菌胶塞立即送检。 　　1.2 细菌培养与鉴定 　　1.2.1 肉眼观察 　　每次接种前应观察标本的性状，如是否为脓性、带血，有无黑色坏死组织或黑色分泌物，有无硫磺样颗粒，是否有恶臭气味等，并做原始记录。 　　1.2.2 直接镜检 　　标本在接种前进行涂片镜检，并做原始记录。 　　1.2.3 所有标本接种培养基 　　所有标本均同时接种1种非选择性的培养基和3种选择性培养基，各种培养基均以北京陆桥技术有限公司所生产的厌氧菌培养基为基础，分别加入不同的抗生素和添加剂，构成不同的选择性培养基。各种培养基添加成分及用途，见表1。另外接种1管增菌液（本室自制），与4种分离培养基一起放入厌氧箱，用厌氧手套箱法进行厌氧培养，初步培养48 h后用放大镜观察平板上的菌落性状，从各个平皿挑取不同的菌落，分纯并做耐氧试验。连续3次耐氧试验证实为专性厌氧菌者，分别接种厌氧菌于微量生化管（购自北京陆桥技术有限公司）上，厌氧培养48 h后记录生化反应结果。如初代培养48 h未见厌氧菌生长，则把增菌液转种BA后与原接种培养基一起继续培养5~7天，仍无菌生长定为阴性。同时对所有标本按常规进行需氧菌的分离培养［3］。表1 各种厌氧菌选择培养基添加成分及用途（略） 　　1.2.4 细菌鉴定 　　可根据厌氧菌的菌体形态、染色反应、菌落性状、溶血性、色素产生以及对某些抗生素的敏感性作出初步鉴定，根据不同的生化反应进行定种［4］。 　　1.3 药敏试验 　　按Nccls标准，采用布氏肉汤稀释法［5］，培养基由北京陆桥技术有限公司提供，并且脆弱类杆菌ATCC25285作为稀释法药敏质控。 　　2 结果 涂片有菌者均培养出细菌。162份标本，细菌培养阴性146份，共分离各种细菌467株。其中厌氧菌培养阳性92份，共分离厌氧菌212株，平均每份2.2株。其中脆弱类杆菌113株，产黑色素类杆菌17株，锐利类杆菌4株，核梭杆菌1株，变形梭杆菌5株，死亡梭杆菌1株，狄氏拟杆菌4株，腐败拟杆菌6株，伤肺拟杆菌3株，口腔纤毛菌3株，腹团拟杆菌2株，不解糖拟杆菌1株，黑色消化球菌1株，大消化链球菌18株，四联消化链球菌3株，普氏消化链球菌7株，厌氧消化链球菌7株，产气消化链球菌4株，双歧杆菌4株，不解乳真杆菌1株，产气荚膜杆菌6株，小韦荣氏杆菌1株。需氧菌培养阳性141份，共分离需氧菌256株，平均每份1.9株。单纯的需氧菌感染和单纯的厌氧菌感染分别占阳性标本的37%和3.4%，而需氧菌同厌氧菌的混合感染占阳性标本的59.6%。各种疾病与细菌感染的关系，见表2。我们用甲硝唑、青霉素、克林霉素、林可霉素、头孢替坦、头孢噻肟、氯霉素、四环素、红霉素、万古霉素等10种抗生素做厌氧菌药敏。经过统计学处理，我们对各种厌氧菌的药敏结果分析，将几种最常见、占多数的厌氧菌的药敏结果报告，见表3。表2 腹内感染时各种疾病与细菌感染关系 例（略）表3 厌氧