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蛋白激酶C在心肌缺血预处理中作用机制探究 　 作者：何斌，王志农，王军，徐志云，黄盛东，曾志勇，张波，张宝仁 【摘要】 目的 观察猫心肺转流（Cardiopulmonary bypass，CPB）中应用蛋白激酶C（PKC）抑制剂-多粘菌素B（Poly B）及PKC激动剂-佛波酯（PMA）对缺血再灌注（IR）心肌组织中PKC激活程度的影响及其与心肌组织内Ca2＋含量变化的关系，评价PKC在缺血预处理（IPC）机制中的作用。方法 将120只健康家猫随机分为对照组、IR组、IPC组、Poly B组和PMA组；建立CPB模型。应用底物蛋白磷酸化法和原子吸收光谱法，分别测定CPB中主动脉阻断（ACC）及再灌注期间心肌组织中胞膜和胞浆中PKC活性以及心肌组织中Ca2＋含量的变化。结果 IR组ACC 60 min后心肌组织胞膜和胞浆中PKC活性均明显降低（Plt;0.01），并于再灌注期间进一步下降，同时伴有心肌组织中Ca2＋含量迅速升高；ACC后各时间点PKC活性均较对照组明显降低（Plt;0.01）；IPC组于ACC及再灌注后胞浆PKC活性较CPB前显著下降（Plt;0.01），但胞膜PKC活性却显著升高（Plt;0.01），而且均明显高于IR组（Plt;0.01）；其心肌组织Ca2＋含量在ACC 60 min以及再灌注期间虽较对照组有所升高（Plt;0.05），但明显低于IR组（Plt;0.01）；Poly B组心肌组织胞膜和胞浆中PKC活性的变化趋势与IR组相似，再灌注期间其Ca2＋含量虽较IPC组有升高趋势，但仍明显低于IR组（Plt;0.05）；PMA组PKC活性以及Ca2＋含量变化趋势与IPC组相近。结论 PKC的激活参与介导了猫IPC的心肌保护作用；PKC抑制剂Poly B不能完全阻断IPC的效应，而PKC激动剂PMA可部分模拟IPC的作用。 【关键词】 缺血预处理；蛋白激酶C；缺血再灌注损伤；心肺转流 　　Role of Protein kinase C in the Protection of Ischemic Preconditioning on the Myocardial Ischemia and Repurfusion Injury in Cat Heart 　　Abstract: OBJECTIVE To investigate the role of protein kinase C (PKC) in mediation of ischemic preconditioning (IPC) against myocardial reperfusion injury by using PKC inhibitor polymyxin B (Poly B) and PKC activator 4β-phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA) during cardiopulmonary bypass (CPB) in feline. METHODS One hundred and twenty felines were randomized into five groups: control group (n＝24), in which CPB was conducted without aortic cross-clamping (ACC); IR group (n＝24), with 60 min cardiac arrest by ACC followed by 30 min reperfusion, and cardioplegia used during the period of ACC ; IPC group (n＝24), with protocol similar to that of IR group except for three-round 15 min IPC applied before ACC; Poly B group (n＝24), with protocol similar to that of IPC group except for polymyxin B administered after starting of IPC; PMA group (n＝24), with protocol similar to that of IR group except for PMA administered before ACC. Membrane and cytosol fraction of PKC activity was assessed by biochemical assays, and myocardial Ca2＋content wa