第二章--载体.pdf

基因工程 第二章基因工程工具酶和载 体 湖南师范大学生命科学学院 袁婺洲 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 本章目录 •2.1 工具酶 •2.2 克隆载体 •2.3 表达载体 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 第二节克隆载体 • 质粒 • 噬菌体 • 柯斯质粒 • 人工微小染色体 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 克隆载体应具备的条件 • 具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性） • 具有与特定受体细胞相适应的复制位点整合位点 • 具有较高的外源DNA的装载能力 • 具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点 • 具有合适的筛选标记 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 一、质粒 • 细菌染色体外的遗传因子，闭合环状双链DNA • 大小：1-200kb • 能自主复制，但要利用寄主细胞复制染色体的同一组酶系 • 复制分松弛型和严谨型两种 松弛型：10-200 拷贝（加氯霉素扩增） 严谨型： 1-10 拷贝 • 有某些基因，如抗药性基因，对寄主的生长是有利的 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 天然质粒 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 质 粒 D N A 的 存 在 状 态 2 0 1 0 湖南师范大学生命科学学院 基因工程 1、质粒的基本特征 （1）质粒的自主复制性：