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超链4病毒的复制
生长与繁殖
• 单细胞生物
• 多细胞生物
• 病毒
– 活细胞内
– 非二分法
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病毒繁殖的概念
• 繁殖的概念
– 侵入敏感细胞
– 借助于宿主细胞
– 装配完整的子代病毒体
– 释放
• 繁殖过程
– 分子水平上
– 病毒基因组的复制与表达的结果
– 非裂殖
– 无生长过程
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噬菌体——细胞培养系统
• 敏感宿主细胞易培养,数目易于控制
• 同步感染,噬菌体繁殖的结果易于观察;
• 繁殖周期短(噬菌体,细菌)
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动物病毒——动物细胞培养系统
• 单层细胞培养方法
• 蚀斑法
Adenovirus Plaque Formation on Monolayer of 293 Cells
Influenza / crystal violet Poliovirus / crystal violet
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植物病毒——植物原生质体培养系统
• 植物病毒的复制研究落后于噬菌体和动物病毒。
• 原生质体的分离和培养方法。
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一步生长实验
• 1939年Delbruck和Ellis首先设计
• 最先用于噬菌体
• 病毒同步感染推知单个细胞
• 潜伏期
• 上升期
• 稳定期
• 裂解量
• 图 一步生长实验
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成熟前期裂解法
• 成熟前期裂解法
– 在病毒成熟释放前(潜伏期的不同时刻),人为地将受感染细胞裂
解,然后测定细胞内病毒活性物质的质和量以及感染性,根据结果
分析研究子代病毒的形成过程。
• 1948年,Doennenn研究T4噬菌体在细胞内的增殖
• 晦暗期(隐蔽期)(eclipse period)
• 生物合成过程
– 亲代核酸转录出信使RNA(mRNA);
– mRNA转译成病毒的酶和早期蛋白;
– 核酸进行自我复制;
– 亲代及子代核酸再转录出mRNA;
– 晚期的mRNA再转译成病毒的结构蛋白和病毒的其它蛋白;
– 装配完整病毒体。
感染单位
动物病毒
4
10
噬菌体
3 植物病毒
10
2
10
101
时间(min )
0 10 20 30 40 50 60
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