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输血相容性检测中的对照实验2
输血相容性检测中的
对照实验
甘 佳
DTM@PUMCH
输血医学
与血液/血液成分输注有关的医学分支
血液/血液成分捐献
免疫血液学/分子生物学/其它实验室技术
临床输血实践
治疗性血液成分单采
干细胞采集
细胞治疗
出凝血管理
……
DTM@PUMCH
输血医学的发展
从临床实践来
血型、采集/保存/输注、输血不良反应……
回归到临床实践
利 弊
DTM@PUMCH
免疫血液学
血液学的分支
抗原-抗体
血液系统疾病病因/ 临床表现
DTM@PUMCH
免疫血液学技术
血清学技术
凝集、沉淀、中和、补体结合
免疫标记技术
酶、荧光、同位素…
抗原多态性-表型
功能
分子基础
DTM@PUMCH
凝集反应
颗粒性抗原与相应抗体特异性结合,出现
肉眼可见的凝集现象
DTM@PUMCH
红细胞凝集
致敏 抗原-抗体特异性结合
凝集 颗粒性抗原被抗体交联,形成
肉眼可见凝集
DTM@PUMCH
“致敏”
抗原表位与抗体可变区可逆结合
非共价结合
静电引力
范德华引力
氢键结合力
疏水作用力
DTM@PUMCH
影响红细胞凝集的因素
DTM@PUMCH
影响红细胞凝集的因素
离心
克服红细胞间斥力,缩短细胞间距,促进凝集
形成
合适的离心力/离心时间
假阳性/假阴性
DTM@PUMCH
影响红细胞凝集的因素
抗原抗体比例
DTM@PUMCH
影响红细胞凝集的因素
pH
pH 6.5~7.5
影响抗原/抗体的电荷分布
个别抗原抗体反应需要较低的pH环境
DTM@PUMCH
影响红细胞凝集的因素
温度
最佳反应温度与抗体类别有关
通常情况下
IgM 22℃
IgG 37℃
DTM@PUMCH
影响红细胞凝集的因素
抗体类别
IgM,5聚体,结合价位多,空间构象大,可在
盐水介质直接凝集红细胞
IgG,单体,结合价位少,分子小,通常需要
AHG桥接形成红细胞凝集
DTM@PUMCH
影响红细胞凝集的因素
增强介质
白蛋白
PEG
聚凝胺
酶
LISS
DTM@PUMCH
抗人球蛋白试验
用于IgG抗体的检测
DAT
IAT
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