紫外分光光度法测定三氯苯酚存在下苯酚的含量.pptVIP

紫外分光光度法测定三氯苯酚存在下苯酚的含量 一、实验目的 1、掌握紫外分光光度计的结构及使用方法 2、掌握等吸光度测量法消除干扰的原理及实验方法。 二、实验原理 分光光度法测定多组份混合物时，通过解联立方程式，可求出各组份含量。对吸收光谱相互重叠的两组份混合物，只要测定其中某一组份含量，可利用等吸光度测量法达到目的。 即对N来说，不论其浓度是多少，△AN＝Aλ1－Aλ2=0。这样，可从两个波长测得M的吸光度差值△AM确定M组份的含量。 所选波长必须满足两个基本条件： ①两波长处干扰组份应具有相同的吸光度，即△AN等于零； ②两波长处待测组份的吸光度差值△AM足够大。 为选择有利于测量的λ1、λ2，应先分别测绘它们单一组份时的吸收光谱，再用作图法确定λ1和λ2。 在待测组份M的吸收峰处或其附近选择一测定波长λ2，作一垂直于X轴的直线，交于干扰组份N的吸收光谱上的某一点，再从此点画一平行于X轴的直线，在组份N的吸收光谱上便可得到一个或几个交点，交点处的波长可作为参比波长λ1。 当λ1有几个位置可供选择时，所选择的λ1应能获得较大的待测组份的吸光度差值。 本实验中，三氯苯酚水溶液和苯酚水溶液的吸收光谱相互重叠，要求测定三氯苯酚存在下苯酚的含量。 三、仪器药品 岛津型紫外-可见分光光度计； 石英比色皿2只， 25毫升容量瓶7个， 5毫升吸量管2支， 25毫升烧杯2个； 苯酚水溶液(0.250g/L）。2，4，6—三氯苯酚水溶液(0.10g／L）。 UV2450型紫外分光光度计 四、实验步骤 （1）苯酚系列标准溶液的配制：取五个25毫升容量瓶，分别加入1.00，2.00，3.00，4.00， 5.00毫升浓度为0.250克／升的苯酚水溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀。 （2）苯酚水溶液及三氯苯酚水溶液吸收光谱的绘制：分别用苯酚水溶液(30.0mg/L)及三氯苯酚水溶液(20.0mg/L)，在220-350nm波长范围，以去离子水作参比溶液，用紫外分光光度计测绘它们的吸收光谱。 得到两条吸收光谱绘于同一坐标上，选择合适的λ1及λ2。在选择的波长λ1及λ2处，再用三氯苯酚溶液复测其吸光度是否相等。 （3）苯酚水溶液的标准曲线绘制及未知试样溶液的测定：在所选择的测定波长及λ2及参比波长λ1处，用去离子水作参比溶液，分别测定苯酚系列标准溶液中含有三氯苯酚的未知试样溶液的吸光度。 五、数据处理 （1）在同一坐标上绘制苯酚水溶液及三氯苯酚水溶液的吸收光谱，并选择合适的测定波长λ2及参比波长λ1。 （2）求出系列标准溶液在两波长处吸光度的差值△Aλ2-λ1。以△Aλ2-λ1为纵坐标，苯酚水溶液的浓度C为横坐标，绘制标准曲线。由未知试样溶液的△Aλ2-λ1值，从标准曲线上求得未知试样溶液中苯酚的浓度(mg／L)。 六、思考题 （1）本实验与普通的分光光度法有何异同? （2）如需测定未知试样溶液中苯酚及三氯苯酚两组份的含量，应如何设计实验?测量波长要如何选择？ * 对含有N和M两组份的试样，设它们的吸收光谱相互重叠，如图6-1。如要求测定M组份含量而消除N组份的干扰，则可从N的吸收光谱上选择两个波长λ1、λ2，在两波长处N组份具有相等的吸光度。