人脐静脉内皮细胞体外分离培养方法改进的探索及鉴定an-眼科学报.pdfVIP

人脐静脉内皮细胞体外分离培养方法改进的 探索及鉴定 An Improved Method of Culturing Human Umbilical Vein Endothelial Cells and its Characterization 林少芬 周焕娇 丁运刚 梁小玲 罗 燕 唐仕波 中山大学眼科学国家重点实验室中山大学中山眼科中心 广州 ， 510060 Shaofen Lin ， Huanjiao Zhao ， Yungang Ding ， Xiaoling Liang ， Yan Luo ， Shibo Tang State Key Laboratory of Ophthalmology ， Zhongshan Ophthalmic Center ， Sun Yat-sen University ， Guangzhou 510060 ， China 目的 建立能大量分离人脐静脉内皮细胞的体外培养的简便方法 分析人脐静脉内皮细胞抗 ： ， 原表达的特点。 方法 采用玻璃接管连接医用三通管灌注 胶原酶 法分离脐静脉内皮细胞 培养于 ： 0．133％ I ， 胎牛血清的人内皮细胞培养液 含 促内皮细胞生长因子和肝素钠 培养皿用 明 10％ （ β－ ）， 1．5％ 胶包被 促进内皮细胞贴壁 培养过程中观察细胞的形态特征 同时行免疫组织化学染色检测 ， 。 ， 第八因子相关抗原 表达情况 鉴定内皮细胞来源 、CD31 ， 。 结果 成功获取人脐静脉内皮细胞 原代人脐内皮细胞 贴壁 第 日细胞融合 第八因子 ： ， 24 h ， 5 ； 相关抗原和 呈广泛的阳性表达 第八因子相关抗原阳性染色程度高于 证实为人 ， ， CD31 CD31 脐静脉内皮细胞。 结论 应用玻璃接管连接医用三通管灌注胶原酶消化法分离脐静脉内皮细胞 利用 优质 ： ， 10％ 胎牛血清的人内皮细胞培养基 添加 促内皮细胞生长因子和肝素钠 并用 明胶包被 ，