SV40PolyA顺式活化基因元件中不完整茎环结构的发现和-生物通.PDFVIP

HEREDITAS (Beijing) 2011 年 ISSN 0253-9772 SV40PolyA 顺式活化基因元件中不完整茎环结构的 发现和序列研究 1，2 1 3 3 1 1 1 王红钢 ，马欢 ，李珠 ，张彬 ，景向阳 ，张媛 ，吕占军 1.河北医科大学实验动物学部遗传研究室，河北省实验动物重点实验室，石家庄 050017； 2.河南大学医学院生物化学与分子生物学教研室，开封 475004； 3.河北医科大学第一医院呼吸内科，石家庄 050031 摘要：本研究室的前期工作发现，Alu 串连序列插入pEGFP-C1 质粒的 GFP 基因下游，瞬时转染 HeLa 细 胞抑制 GFP 基因表达，2F2R （来自SV40PolyA 反序 5’端的第 2 个 60 bp ）插入 GFP 和Alu 串连序列之间 可以解除Alu 序列对 GFP 基因的抑制作用。文章通过删减 2F2R 发现，45R （2F2R 5’端的 45 bp ）、30R 和 22R 可以活化基因，且二串连体活化基因作用高于单体。Secloop （2F2R 近中部的 22 bp)和 Poly4 （2F2R 3’ 端的 30 bp)不能活化基因。30R 与 Poly4 用 9 碱基连接形成 30R-Poly4，其活化基因作用低于2F2R ，两个 22R 之间连接碱基数对活化 GFP 基因作用没有明显的影响。22R （5’-GTGAAAAAAATGCTTTATTTGT- 3′） 含有不完整的回文序列，可以形成不完整的茎环结构，包括一个 3 碱基 loop、3 bp 第一茎、2 碱基泡和 3 bp 第二茎。改变 22R 茎环结构的碱基突变明显影响其活化 GFP 基因的作用，过 多互补和过少互补的茎 环结构均不利于活化基因，提示适当的不完整茎环结构与活化基因有关。 关键词：非编码序列；GFP；茎环结构；Alu ；SV40PolyA Detection and sequence analysis of an imperfect stem-loop structure in cis activating gene element from SV40PolyA 1,2 1 3 3 1 WANG Hong-Gang , MA Huan , LI Zhu , ZHANG Bin , JING Xiang-Yang , 1 1 ZHANG Yuan , LU Zhan-Jun 1. Department of Genetics, Hebei Key Lab of Laboratory Animal, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, China; 2. Department of Biochemistry and Molecular Biology, Medical College, Henan University, Kaifeng 475004, China; 3. Department of Respiratory Medicine, The First Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050031, China 收稿日期：2010-09-06 ； 修回日期：2010-10-29 基金项目：河北省自然科学基金（编号：C2008001065 ）和河北省支撑计划项目(编号-90)资助 作者简介：王红钢，讲师，博士研究生，专业方向：基因表达调节。E-mail: whg1975316@ 通讯作者： 吕占军，博士生导师，研究方向：衰老机理。E-mail:LSLAB@