弧菌标准菌株外膜蛋白的比较研究.pdfVIP

，一一 ) 微 生 物 学 报37(6)：449～454，1997 c M~crobiologica Sinica 弧菌标准菌株外膜蛋白的比较研究 整堕 ：．Robertson P2．Austin B ．徐怀恕 bPn (2英目№ —w 学 物 爱T ) ·／2 △摘要对， 种弧菌标准菌株的外膜蛋白 。M 进行了比较研究， i磊象 株外膜 ，I蛋白的sDs — PAGE图谱各不相同 不同菌株的外膜蛋白有很太差异，一般为3～7条，分子量 范围 q10tiff～1 401)0 舅新苗接右相同的丰喜外瞄蛋白加54000．41nnn和27000 许舅苗桃 所共有．但未发现所有菌株共同的外膜蛋白 关键词 孤菌．标准菌株．外膜蛋白，SDS—PAGE ■--—一 弧菌属是生存在淡水与海水环境中的一大类革兰氏阴性杆菌，其轴或直或弯。通常 以单极生鞭毛运动 细胞色素氧化酶阳性，对o，l29敏感，可以D_葡萄糖为唯一的或 主要的碳源和能源进行呼吸和发酵 现已发现越来越多的弧菌可引起人类、海洋无脊椎 动物和海洋脊椎动物的疾病。如霍乱弧菌．副溶血弧菌、溶藻胶弧菌、剖伤弧菌、梅氏弧 菌 哈维氏弧菌、河弧菌及鳗弧菌 等。进一步对这～类群细菌的致病性研究很有必 要。 革兰氏阴性菌细胞壁的最外层由蛋白质、脂蛋白和脂多糖构成，称 外膜(Outer membrane)”。外膜蛋白构型的比较研究对致病菌或临床上重要的细菌的流行病学研究有 重要作用。而且因为外膜蛋白参与抗原反应，外膜蛋白的SDS—PAGE提供了另一个血清 型技术 。 从细菌中提取外膜蛋白有多种不同的方法，其主要方法一是可用不连续蔗糖梯度超 速离心得到细菌外套，再进一步提取外膜 】，一是可用EDTA等处理细菌细胞壁使外膜 从整个细菌上释放出来 】。作者按改进的PoxtonI~l的方法提取了32个弧菌标准菌株的 外膜蛋白，并对其进行了比较研究。 p 1 材料和方法 1．1 实验菌株 弧菌标准菌株72，280，28l，283，285，286，287，288，289，290，291，292，293，294， 295，296，297，298，299，300，30l，302，303，305，306，307，308，309，310，3l4，6l1和 togei均来自英国Heriot-Watt大学生物学系(表1)， ·欧洲共同体唆 展中国家生命科学和技术计划 资助项目，资助号为s1B(Ts3 4-0269) 丰研究的主要工作在英国№no卜wat【大学生物学系进行 本文干l997年2月】7日收到． 450 微 生 物 学 报 37卷 表1 供试弧菌标准菌株 1．2 外膜的制备 Table I Type strains of Iqbrlo sp LIsed in Ibis study 弧菌标准菌株接种在 Marine Agar fDlFCO1平板上， 于25℃培养48h。将菌苔收集 鳗孤菌 anguillarur~ 至9mlPBS．振荡均匀 将细菌 ada~plus 在4℃离心洗涤三次(60oor／ 辛辛那提弧菌 aesmarianus min，l 5min)，于波长525nrn处 溶||腔弧菌 d