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基因工程绪论2010.3.3 二十一世纪——生命科学世纪 基因工程 酶工程 发酵工程 细胞工程 蛋白质工程 本讲的主要内容 一、基因工程的定义 二、基因工程的理论依据 三、基因工程的主要研究内容与技术路线 四、基因工程的发展史 五、基因工程的应用 六、基因工程的安全性 基因是什么？ 一、基因工程的定义 显微镜下看到的人类染色体 基因是什么？ 基因的概念： 基因是具有生物学功能的、在染色体上占据一定位置的一段核苷酸序列，是分子遗传的功能单位。 基因工程定义 基因工程(gene engineering),也叫 ---分子克隆(molecular cloning) ---基因操作(gene manipulation) ---重组DNA技术(recombinant DNA technology) 基因工程的定义 在体外把核酸分子（DNA的分离、合成）插入载体分子，构成遗传物质的新组合（重组DNA），引入原先没有这类分子的受体细胞内，稳定地复制表达繁殖，培育符合人们需要的新品种（品系），生产人类急需的药品、食品、工业品等。 基因工程的主要特征： 1、具跨越天然物种屏障的能力。 2、 强调了确定的DNA片段在新寄主细胞中的扩增。 二、基因工程的理论依据 不同基因具有相同的物质基础 基因呈线性排列在DNA上并可切割、转移 基因与多肽存在对应关系 遗传密码具有通用性 基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代 三、基因工程的主要研究内容与技术路线 基因工程的主要研究内容 1、目的基因的分离 2 、DNA的体外重组（载体、受体系统等） 3 、重组DNA分子转移到受体细胞及其筛选 4、基因在受体细胞内的扩增、表达、检测及其分析。 基因工程的主要技术路线：见P2 生物材料 克隆载体 获得目的基因 重组DNA 转基因生物 受体细胞 克隆子 如农杆菌介导的植物转基因 四、基因工程的发展史 1、准备阶段 ?1944年，AVERY证明遗传物质是DNA； ? 1953年，J. Watson和F. Crick根据DNA结晶的X-衍射图谱和分子模型提出核酸双螺旋结构；? ? 1958年Crick将生物遗传信息的这种传递方式称为中心法则；? ? 20世纪60－70年代，基因工程相关酶的发现与应用 ? 中心法则示意图 DNA RNA 蛋白质 复制 复制 转录 反转录 翻译 ? 2、基因工程问世 ? 1972年，美国人 D.Bery SV40 DNA EcoRI λ-Phage EcoRI 重组DNA分子（杂种） T4连接酶 ? 1973年，S.N.Cohen RSF1010 Plasmid Ampr PSC101 Plasmid Tcr E.coli EcoRI 连接 1974年后 非洲爪蟾核糖体基因 PSC101 Plasmid Tcr E.coli EcoRI 连接 真正打破物种屏障!! 3、基因工程的迅速发展阶段 1980年，通过显微注射培育世界第一个转基因动物－－－转基因小鼠； 1983年，通过农杆菌介导法培育出世界第一个转基因植物－－－转基因烟草； 此后，转基因进入飞速发展阶段，包括利用此技术进行动物、植物、微生物的改良与生产药品、食物等。 五、基因工程的应用 1、20世纪80年代开始基因工程药物生产 ▲方向：开发用于治疗癌症、心脑血管疾病、艾滋病、遗传病等各种重大疾病药物； ▲药物领域：细胞因子、生长因子、疫苗、基因治疗、疾病诊断； ▲药物生产: ---主要是利用生物技术结合微生物的特点进行药物生产。 如美国，1982年FDA批准第一个基因工程药品——重组人胰岛素上市，主要采用大肠杆菌表达系统，年产1200公斤，年产值9亿美元； 中国，1989年第一个拥有知识产权的基因工程药物---重组人干扰素α1b（IFN）上市。 2001年，美国已有： 117种基因工程药物、疫苗上市 500多种处于临床研究 2000多种处于研发阶段 美国基因工程药物药品销售额： - 1996年，80亿美元 -2000年，300亿美元 我国已商品化的基因工程药物 名称 适应症 上市年份 α1b干扰素(外用) 病毒性角膜炎 1989 α1b干扰素 乙肝、丙肝 1996 α2a干扰素 乙肝、丙肝 1997 α2b干扰素 乙肝、丙肝 1996 γ干扰素 类风湿 1994 白介素-2（IL-2） 癌症辅助治疗 1997 粒细胞集落刺激因子（G-CSF