谷氨酸肽脂的合成与生物素修饰.doc

谷氨酸肽脂的合成与生物素修饰 1、相关定义 1.1、凝胶的概念 凝胶又名”凝固”的胶体,是一种特殊的物质存在状态,它介于固体和液体之 间,目前还没有对它的严格定义。此处凝胶的凝固并非真正意义上的固体状态,而 只是失去了宏观的流动。也就是说,凝胶虽然没有宏观流动性但也不是真正意义上 的固体,它仍然是胶体。目前认为 Flory 对凝胶的定义比较全面准确:(a)该物质须在 一定时间尺度范围内具有永久不变的宏观结构,(b)具有和固体一样的流变学特性[6]。 - 1 - 它是一种常见的物质存在状态,但是人们很难把它和胶体明确的区分开来,在英语 中,凝胶的英文单词是”gel”,胶体的英文单词是”colloid”,虽然名称显著不同, 但是实际上凝胶是胶体的一种,凝胶和溶胶共同构成了胶体[7]。Jordon Lloyd 在 80 年前就指出”凝胶、一种胶体状态,容易识别却难以定义”。 胶体在胶体化学中有非常明确的定义:分散质粒子在 1 nm~1000 nm 之间的分散 体系[8];按照分散剂的不同分为固溶胶、气溶胶、液溶胶;按照分散质的不同分为分 子胶体、粒子胶体,按照这些凝胶的定义,固溶胶就是我们所说的凝胶,而气溶胶 和液溶胶只有在失去宏观流动性时才能称之为凝胶,我们常见的凝胶一般都是液溶 胶在特殊条件下失去宏观流动性而得到的,直接失去流动性的气溶胶而得到凝胶的 例子非常罕见,通常,气凝胶(xerogel)是由液凝胶的溶剂挥发而得到的,所以又称干 凝胶(dry gel)[9]。按组成凝胶胶凝剂的不同,凝胶可以分为无机颗粒凝胶、小分子凝 胶和大分子凝胶。凝胶中人们研究最多的是通过化学交联的大分子而得到的化学凝 胶,大分子凝胶的研究已经开始了非常长的时间,已经相当成熟,甚至很多已经进 入实际应用阶段,例如在生物分离领域应用特别广泛的凝胶电泳,所应用的就是一 种大分子化学凝胶。在十九世纪末,人们发现了小分子凝胶,从此人们开始逐渐对 小分子凝胶进行了研究。但是,对小分子凝胶的系统研究是从 1987 年 Weiss 等[10]报 道了一个小分子胶凝剂以后才开始的,在这之后才掀起了人们对小分子凝胶的研究 热潮。 1.2、化学修饰电极的基本概念和原理 化学修饰电极的基本概念 由于电化学反应一般在电极/溶液界面进行,因此电极表面的性能是进行电化学 反应的关键因素。要改善电极表面的性能往往需要对电极表面进行有目的的修饰,使 电极具有所期望的性能。于是通过吸附、聚合、共价键合等手段把具有不同功能、特 点的物质修饰到电极表面以借助这些修饰剂的特性来提高电极的选择性、灵敏度,从 而可以进行我们所希望的电极反应,达到在分子水平上实现电极功能设计的目的。化 学修饰电极构成了一种具有某种预定的性质的近代的电极体系,与其他电极相比,它 最突出的特性是,在电极表面接着或涂敷了具有选择性化学基团的一层薄膜(从单分 子到几个微米)。它是按照人们意图设计的,并赋予了电极某种特定的性质,如化学 的、电化学的、光学的和传输性等,因此化学修饰电极在提高选择性和灵敏度方面具 有独特的优越性。 化学修饰电极可利用电催化反应以提高测定的选择性和灵敏性;可利用离子交换 表面配合反应进行富集分离;可利用修饰膜的渗透选择性,起到”分子筛”作用而进 4 行分离;可利用媒介作用,加速氧化还原蛋白质在电极表面的电子传递过程;可利用 专一结合作用,将抗原/抗体专一结合应与化学放大作用相结合,设计新型电化学生 物传感器。化学修饰电极在分析测定方面有着十分广泛的应用。 普鲁士蓝修饰电极的基本原理 普鲁士蓝薄膜有”可溶性”与”不可溶性”两种形式,由于都含有铁氰根,因而 都有良好的化学稳定性与电活性。图1.3是普鲁士蓝修饰电极的经典的循环伏安图, 从图上可以看出,在电极反应过程中有两对氧化还原峰,在较负电位(大约 +0.2V ,vs.Ag /AgCl),高自旋Fe3+/Fe2+发生氧化还原反应,PB被还原为普鲁士白 (Prussian White,PW);在较正电位处(大约+0.9V, vs.Ag/AgCl),低自旋Fe(CN)63-/4-发 生氧化还原反应,普鲁士蓝被氧化为普鲁士黄(P russianY ellow,P Y)与普鲁士绿 (PrussianG reen,P G;又名柏林绿,Berlin Green)的混合物[22-23]。 图1.3 普鲁士蓝的循环伏安曲线 KFeFeⅡ(CN)6 + e + K+ === K2FeⅡFeⅡ(CN)6 在0.2V(Vs Ag/AgCl)处 (1) FeFeⅢ(CN)6 + e + K+ === KFeⅢFeⅡ(CN)6 在0.9V(Vs Ag/AgCl)处 (2) 当电极表面有易氧化和还原的物质存在时,峰高产生相应的变化。峰高的变化值 可以作为定量分析这些