东乡野生稻苗期抗寒性QTL的初步定位.pdfVIP

·56· 东乡野生稻苗期抗寒性QTL的初步定位 左佳1．一，高婧”，贺荣华1’2，李丁L2，韩小霞∽，邢俊杰1”．李祺1，曹孟良L2，+ (1．中南大学研究生院隆平分院杂交水稻国家重点实验室，湖南长沙410125； 2．国家杂交水稻工程技术研究中心。湖南长沙410125) 擒要：以93Il／东乡野生稻F2群体为材料，用I傩对ssR标记构建连锁图谱，以苗期分蘖叶片相对电导率为抗寒性鉴定指标，采 用完备区间作图法检测抗寒性QIL。结果在第3号和lI号染色体上定位到2个与抗寒性相关的Q11Lgs伽和庐cRJ』．其表型贡 献率分别为16．3％和19．2％。 关键词：东乡野生稻；抗寒性；QTL定位；相对电导率 中图分类号：S5lI．Ol；Q78文献标识码：A 文章编号：1005—3956(2012J03—0056—04 水稻是一种温度敏感型作物，极易遭受低温冷 1．2实验方法 害，从而造成产量损失，如中国南方的双季早稻生长 1．2．1 引物合成及水稻基因组DNA提取参照网 前期遭遇倒春寒低温天气危害，生长发育会受到影 站httP：／／w硼。．伊锄em．org公布的信息，在水稻全 响，造成减产，进而影响农民的种粮积极性…。因 此，培育耐冷水稻品种成为育种家们的重要任务。 合成。在水稻苗期取亲本及F：群体各单株幼嫩叶 江西东乡普通野生稻是迄今分布最靠北的一种 片，采用CTAB法提取DNAL6J。 野生稻，能耐1月份平均气温5．2℃、极端最低气温 1．2．2多态性标记的筛选及群体检测以2亲本 一8．5℃的低温旧J。萍乡市农科所研究发现，不仅 DNA为模板，PcR扩增筛选在亲本间具多态性的引 东乡普通野生稻的宿根能安全度过冬季15d以上 物，并以多态性引物对F2分离群体进行检测。PcR 低于0℃的低温，而且在幼苗期和抽穗期能抗长期 反应体系为15pL体系：50ng／pLDNA模板2灿， 低温¨J。陈大洲等H1利用5个栽培品种与东乡野10×Bu自fer mmoL／LdNTP 1．5斗L，2．5 O．6卜L，10 生稻杂交进行遗传分析，结果表明东乡普通野生稻 咖oL／L 0．15 SsR弓l物0．6弘L，5U／啡LrT．aq pL，灭 的耐寒性为完全显性，由2对基因控制；简水溶等”J 菌dd}12010．15灿。PCR反应程序为：94℃预变性 利用东乡普通野生稻／协青早B／／协青早B构建的 4min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s， 回交重组自交系群体(BC．F。)进行苗期耐冷性鉴定共35个循环；最后72℃延伸7min。部分引物的退 和遗传分析，发现东乡野生稻苗期耐冷性表现为质 火温度有变化，适时作出调整。PCR产物以10％聚 量一数量性状遗传特征，由主基因+多基因控制。 丙烯酰胺凝胶电泳检测，银染及各项电泳参数参考 但是目前对东乡野生稻抗寒性基因进行定位、克隆 张玉山等…的方法。 的报道较少。利用分子标记定位其抗寒性基因，可 1．2．3抗寒性鉴定通过测量叶片电导率的方法 为分子标记辅助育种提供基础，也可以加深对东乡 鉴定单株的抗寒性悼1。由于F：群体还要用于构建 野生稻抗寒机制的研究。 重组自交系或其它高代回交群体，因此无法直接对 本试验利用93ll与东乡野生稻杂交的F：群 体。以叶片相对电导率作为抗寒性鉴定指标，对东乡 收稿日期：2012—02一鸺 野生稻苗期抗寒性QTL进行定位。 l材料与方法 业部转基因生物新品种堵育重大专项(2008瑚8∞l， 2009Z)(吣∞l—oIOBl 1．1水稻材料