人APOBEC-3F和-3G的克隆表达、亚细胞定位及其抑制HBV的研究.pdfVIP

Research Papers Pi g]1]豢筹展B／ophy。妇 www．pibb．ac．cn 人APOBEC．3F和．3G的克隆表达、亚细胞定位 及其抑制HBV的研究掌 王革非1，∞ 彭 程剪 李卫中t，∞ 辛 岗t，2) 苏 芸1，2) 陈幼莹1，∞林桂梅1，力李康生1’2)．‘ (”汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室。汕头515041；蝴b头大学医学院广东省免疫病理重点实验室，汕头515041； ∞华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科，武汉430030) 摘要载脂蛋白B B mRNA编辑酶催化多肽(apolipoproteinmRNA-editingenzyllle 究，为进一步利用APOBEC家族蛋白开发抗HIV及HBV药物提供基础． 关键词载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽，表达，亚细胞定位，／-IBV，核定位信号 学科分类号R392，Q7 DoI：10．3724／SP．J．1206．2008．00448 载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽作用． B enzynlecatalytic-- 为研究APOBEC的抗病毒作用，本文对 (apolipoproteinmRNA··editing polypeptide，APOBEC)家族，是近年来发现的具有 抗多种病毒作用的天然免疫分子【¨．APOBEC属于和．3G，进行了克隆、表达及亚细胞定位研究，为 细胞胞嘧啶脱氨酶家族，能够诱导DNA或RNA 中的胞嘧啶(C)通过脱氨基作用转换为尿嘧啶t-o)t习．药物提供基础． 人来源的APOBEC家族成员包括APOBEC．1、 1材料与方法 APOBEC-2、APoBEC．3A、APOBE(3B、APOBE( 3C、APOBEC．3D／E、APOBEC．3F、APOBEC．3G、1．1质粒 APOBEC．3H和APOBEC-4【3】．APOBEC家族蛋白pcFlag真核表达载体为汕头大学医学院微生物 对多种病毒具有抑制或超突变作用，包括人免疫缺 学与免疫学教研室构建保存，该质粒以peDNA3 virus，HlV)一~q、 陷病毒(humanimmunodeficiency Vigils。 猿猴免疫缺陷病毒(simianimrnunodeficiency virus，PFv)羽、乙型肝炎 sIv)r日、泡沫病毒(foamy 04020239)资助项目． B 病毒(hepatitisvirus，i-mv)隗tOl、腺相关病毒(adeno- ¨通讯联系人． associatedvirus，any)111]等多种病毒．因此， Tel：0754E-mail：ksli@,stu．edu．cn APOBEC家族蛋白在抗感染天然免疫中具有重要收稿日期：2008-06-23，接受日期：2008-09-22 ·332· 生物化学与生物物理进展Prog．Biochem．Biophys． 2009；36(3) 为骨架，在CMV启动子下游、多克隆位点前加入 循环；94℃30S，59℃30s，72℃1min，共32个 了Flag标签(DYKDDDDK)． 循环；72℃5 1．2细胞及培养基 canine 基因测序． 犬肾上皮细胞系Madin—Darbykidney