流式实用技巧-merckmillipore.pdf

流式细胞术实用技巧 Sukie Gong Imaging Field Application Scientist– Instrument Platform, Bioscience 26 June, 2015, Wuhan Agenda • Flow Cytometry Introduction • Tips in Flow Cytometry Step 1：样品准备 Step 2：试剂选择 Step 3：染色流程 Step 4：仪器质控 Step 5：数据采集与分析 The Conversion of Reseach Focus Why more people focus on flow cytometry? Gene Genome DNA Methylation Epigenome Transcript Transcriptome Protein Proteome Strength in integrity Cytology Cell What is Flow Cytometry? Flow Cyto Metry Fluid Cell Measurement What is Flow Cytometry? 流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物 粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个 细胞中测得多个参数。  检测样本： 外周血，骨髓，穿刺液，洗脱液，尿液，唾液，实 体组织，培养细胞，微生物，微球、血清、细胞裂 解液等  提供的信息： 相对细胞大小(FSC) 相对细胞颗粒密度和内部复杂度(SSC) 染色过细胞的相对荧光强度(Fluorescence) 流式细胞仪的基本组成 硬件系统 液流系统 光学系统 电子器件 软件系统 硬件系统——液流系统原理 将样本悬液聚焦在光源的中心处 Traditional Guava-Patented Sheath Fluid System Micro-capillary System Sheath Fluid: ~10 mL/Test Sheath Fluid: None Waste: 8,000 mL per 8 hr run Waste: 50 mL per 8 hr run Typical # Cells Per Protocol: 100,000 –