仪器分析-第5章分子发光分析法.pptVIP

分子发光分析法 基态分子吸收了一定能量后，跃迁到激发态，当激发态分子以辐射跃迁形式将其能量释放返回基态时，便产生分子发光。依据激发的模式不同，分子发光分为光致发光、热致发光、场致发光和化学发光。光致发光按激发态的类型不同又分为荧光和磷光两种。本章主要讨论：分子荧光(Molecular Fluorescence)、分子磷光(Molecular Phosphorescence)化学发光分析法(Chemiluminescence) 2、荧光与分子结构的关系 ????跃迁是产生荧光的主要跃迁类型。 实验证明，对于大多数荧光物质，首先经历????或n???激发，然后经过振动弛豫或其他无辐射跃迁，再发生????或???n跃迁而得到荧光。在这两种跃迁类型中，????跃迁常能发出较强的荧光（较大的量子产率,????跃迁是产生荧光的主要跃迁类型。 取代基对苯的荧光影响 2)生物与有机化合物的分析 脂肪族有机化合物的分子结构较为简单,本身能发生荧光的很少,一般需要与某些试剂反应后才能进行荧光分析,如丙三醇与苯胺在浓硫酸介质中反应生成发射蓝色荧光的喹啉，据此可以测定0.1~2μg?mL?1的丙三醇. 芳香族化合物因具有共轭的不饱和体系,多数能发生荧光,可直接用荧光法测定. 第二节 磷光分析法 一、概述 磷光的寿命和辐射强度对于温度、重原子和顺磁性离子敏感 10-4-10s 10-7-10-9s 寿命 λ (激发) λ(荧光) λ(磷光) λ 激发三重态→ 基态单重态 激发单重态→ 基态单重态 成因 磷光 荧光 项目 荧光与磷光比较 　　磷光具有如下三个特点: 分子的T1态能量比S1态低。 （1）磷光辐射的波长比荧光长 （2）磷光的寿命比荧光长 　　由于荧光是S1 ? S0跃迁产生的，这种跃迁是自旋许可的跃迁，因而S1态的辐射寿命通常在10-7~ 10-9s，磷光是T1 ? S0跃迁产生的，这种跃迁属自旋禁阻的跃迁，其速率常数要小，因而辐射寿命要长，大约为10-4~ 10s。 （3）磷光的寿命和辐射强度对于重原子和顺磁性离子敏感 二、基本原理 （一）磷光的强度 　　由于激发三重态的寿命长，使激发态分子发生 T1? S0非辐射去活化过程几率增大，这些都将使磷光强度减弱，甚至完全消失。为减少这些去活化过程的影响，通常应在低温下测量磷光。低温磷光分析中，液氮是最常用的合适的冷却剂。因此要求所使用的溶剂，在液氮温度（77K）下应具有足够的粘度并能形成透明的刚性玻璃体，对所分析的试样应具有良好的溶解特性。最常用的溶剂是EPA，它由乙醇、异戊烷和二乙醚按体积比为2:5:5混合而成。 IP = 2.3 ?P I0 ?bc=Kc (二）温度对磷光强度的影响 （三）重原子效应 使用含有重原子溶剂或在磷光物质中引入重原子取代基(当分子中引入重原子取代基，例如，当芳烃分子中引入杂原子或重原子取代基时)，都可以提高磷光物质的磷光强度，这种效应称为重原子效应。前者称为外部重原子效应。后者称为内部重原子效应。 （四）室温磷光 由于低温磷光需要低温实验装置，溶剂选择的限制等因素，从而发展了多种室温磷光法（RTP）。 （1）固体基质室温磷光法（SS-RTP） 此法基于测量室温下吸附于固体基质上的有机化合物所发射的磷光。所用的载体种类较多，有纤维素载体（如滤纸、玻璃纤维）、无机载体（如硅胶、氧化铝）以及有机载体（如乙酸钠、聚合物、纤维素膜）等。理想的载体是既能将分析物质牢固地束缚在表面或基质中以增加其刚性，并能减小三重态的碰撞猝灭等非辐射去活化过程，而本身又不产生磷光背景。 * 第五章 分子发光分析法 Molecular Luminescence 第一节 荧光分析法 第二节 磷光分析法 第三节 化学发光分析 教学目标与要求：掌握分子发光分析法（荧光分析法、磷光分析法）的基本原理，熟悉荧光分析仪器、磷光分析仪器的结构原理。 教学重点：分子发光（分子荧光、分子磷光）分析法的基本原理。 教学难点:理解振动弛豫、内转化、体系间窜跃的意义，并能正确地区别三者之间的差别。 教学方法：讲解、练习 荧光： 16世纪：在矿物和植物提取液中发现荧光； 1575年：Monardes—植物愈创木切片黄色水溶液—天兰色荧光； 1852年：Stokes阐明荧光发射机制（分光计观测奎宁和叶绿素的荧光，发现波长稍长于入射光的波长——认识到荧光为“重新发光”而不是漫射光； 1905年：Wood发现气体分子的共振荧光； 1926年:Gaviola直接测定了荧光寿命； 1923年：荧光X射线光谱； 1964年：原子荧光光