中科院信号转导1.pdf

泛素化是对特异的靶蛋白进行泛素修饰的过程。一些特殊的酶将细胞内的蛋白分类,从中选出靶蛋白分子。泛素化 修饰涉及泛素激活酶E1、泛素结合酶E2和泛素连接酶E3 的一系列反应:首先在ATP供能的情况下酶E1(蛋白质编 号1r4n)粘附在泛素分子尾部的Cys残基上(在这个结构中,Cys突变为Ala)激活泛素,接着,E1将激活的泛素分子转 移到E2酶上(蛋白质编号1fxt),随后,E2酶和一些种类不同的E3酶共同识别靶蛋白,对其进行泛素化修饰。根据E3 与靶蛋白的相对比例可以将靶蛋白单泛素化修饰和多聚泛素化修饰。E3酶(蛋白质编号1ldk和1fqv)的外形就像一 个夹子,靶蛋白连接在中间的空隙内。酶的左侧结构域决定靶蛋白的特异性识别,右侧结构域定位E2酶以转移泛素 分子。 第一章 谢旗信号转导 1、信号转导的三个步骤： ①信号的接受， ②信号的转换：第一信使和第二信使的级联放大作用 ③诱发的反应：a：调节一种或多种细胞活动； b：改变酶活性，包括转录调节和蛋白质翻译后修饰 2、信号的来源：内源（胞内受体）和外源（细胞表面受体） 3、信号分子特点：①非遗传性②延长细胞效应 4、信号途径 ①特异性；②多样性；③细胞反应多样性；④关键分子：蛋白质；⑤信号途径是一个放大过程；⑥胞内信号转导需 要一个受体 膜信号的两个例子： ①通过磷酸化，失活受体通过ATP磷酸化使其活化； ②通过GTP结合蛋白，受体与GDP结合时是失活状态，与GTP结合后活化 5、受体种类：细胞表面受体和胞内受体 受体特征：饱和性、特异性，高亲和性、可逆的、在体外可重建、克隆的受体在本体中有作用 6、G蛋白信号通路 然后cATP激活激酶A，并将激酶A转运至核孔中，通过 磷酸化活化基因转录蛋白， 进而活化靶基因，促进转 录调控。 受体酪氨酸激酶途径： A， 酪氨酸激酶受体RTK，是催化性受体，不是离 D，不生成腺苷酸环化酶，生成的是活化的Ras 子通道 E. 与配体结合后引起胞质侧酶活性部位活化 B，RTK-Ras通路，不需要G蛋白介导 C，活化的是MAPKKK，即Ras，不是PKA 7、MAP激酶通路 蛋白质翻译后修饰种类：磷酸化、糖基化、甲基化、泛素化、乙酰化、脂肪酸化、羟基化。1.组蛋白修饰控制多种 核内活动；2.质膜蛋白的N-糖基化；3.胞质和核内蛋白的O-糖基化；4.一系列磷酸化控制许多信号通路；5.各种 修饰调控微管功能；6.质膜蛋白通过糖基化磷脂酰肌醇锚定到膜上；7.多聚泛素化导致蛋白质降解。 8、泛素化作用：一、与降解相关；二、降解无关 泛素化过程：在第一步反应中，泛素活化酶 （又被称为E1）水解ATP并将一个泛素分子腺苷酸化。接着，泛素被转 移到E1 的活性中心的半胱氨酸残基上，并伴随着第二个泛素分子的腺苷酸化。被腺苷酸化的泛素分子接着被转移 到第二个酶，泛素交联酶 （E2）的半胱氨酸残基上。最后，高度保守的泛素连接酶 （E3）家族中的一员 （根据底物 蛋白质的不同而不同）识别特定的需要被泛素化的靶蛋白，并催化泛素分子从E2上转移到靶蛋白上。靶蛋白在被 蛋白酶体识别之前，必须被标记上至少四个泛素单体分子 （以多泛素链的形式）。因此，是E3使得这一系统具有了 底物特异性。靶蛋白最终在26S蛋白酶体内被降解。 泛素连接酶（E3）：特异性降解底物。 E1、E2和E3蛋白的数量依赖于生物体和细胞类型，人体中就存在大量不同的E3蛋白，这说明泛素-蛋白酶体系统 可以作用于数量巨大的靶蛋白。在胞饮，小泡运输等的选择，病毒的出芽等细胞内的物质流通系统，或是DNA修复， 翻译控制，信号传递中，泛素是起到了信号分子的作用，形成了巨大的 “蛋白质的由蛋白质进行的对蛋白质翻译后 的修饰系统”。 泛素是一种存在于大多数真核细胞中的小蛋白。它的主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解。当附有泛 素的蛋白质移动到桶状的蛋白酶的时候，蛋白酶就会将该蛋白质水解。泛素也可以标记跨膜蛋白，如受体，将其从 细胞膜上除去。 泛素由76个氨基酸组成，分子量大约8500道尔顿。它在真核生物中具有高度保留性，人类和酵 母的泛素有96%的相似性。需要被