QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书-博奥龙免疫.PDF

QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书 QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书 产品描述 QuickShuttle系列转染试剂是一类具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试 剂，具有高效、低毒和易于使用等优点。QuickShuttle 区别于常规转染试剂的两个最主要 特点是：（1）可以在细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染（立传立转）；（2）转染操作 可在一分钟内完成。因此，QuickShuttle特别适合用于快速大量制备高滴度的各种病毒载 体和假病毒载体。 重要提示 1. 与常规转染试剂不同，使用QuickShuttle可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染（立 传立转），从而可节省 1 ~24小时的转染前细胞培养时间。 2. QuickShuttle极大简化了转染操作，转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接 加入含血清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血清或更换培养基，整 个转染操作可在一分钟内完成。 3. 立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得QuickShuttle特别适合用于快 速大量制备高滴度的各种病毒载体和假病毒载体。 4. QuickShuttle能够用于慢病毒、逆转录病毒、腺相关病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒、流 感假病毒和人乳头瘤假病毒等各种病毒载体和假病毒载体的制备。 5. QuickShuttle经过DMEM RPMI-1640和M199等常规培养基测试，虽然在实验中推荐 DMEM M199 QuickShuttle Vero 使用 ，但有实验结果表明 能够显著增强 对 细胞和 293FT细胞的转染效果，因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。 6. 为了方便操作，推荐在75cm 和175cm 细胞瓶中使用QuickShuttle制备各种病毒载体2 2 和假病毒载体。备注：不推荐使用各种细胞板和培养皿。 7. QuickShuttle转染试剂建议常温运输，2~ ºC保存（在-30ºC到常温范围内均可长时间 稳定保存），无菌取用，有效期1 个月。 北京博奥龙免疫技术有限公司 第 1 共 6 Tel:010 QQ:473644017 QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书 名称：QuickShuttle-293 (293细胞专用QuickShuttle转染试剂) 货号：KX0110044 含量：0. ml 用途：用于转染各种293细胞制备病毒载体和假病毒载体。 注意事项： 1. 质粒DNA：请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒DNA。 2. 0.85% W/V 稀释液： （ ）生理盐水，用低内毒素纯水配制，高压消毒或除菌过滤。 3. 培养基：经过DMEM RPMI-1640和M199等常规培养基测试，推荐使用含5~10%牛 血清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。 4. 对于75cm 细胞瓶，推荐每瓶培养基用量为20ml、质粒DNA用量为40µg、转染试剂2 用量为80µl；对于175cm 细胞瓶，推荐每瓶培养基用量为45ml、质粒DNA用量为2 90µg、转染试剂用量为180µl。质粒DNA和转染试剂用量可在正式实验前根据不同细 胞和不同培养基用报告基因在推荐用量附近进行优化。 5. 在不同尺寸细胞瓶中进行转染，培养基、质粒DNA和转染试剂三者用量比例保持不 变。在适当减少培养基用量 （不少于推荐用量的一半）前提下，可按比例节约质粒 DNA和转染试剂用量。 6. 对于共转染，质粒DNA 总量按上述推荐量，但不同质粒DNA 的比例应根据不同质粒 的作用并通过预实验确定。 7. 可使用本试剂进行立传立转和标准转染（即细胞传代18~24小时后进行转染）。 8. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至80-90%成片或刚长满。若使用生长 过老的细胞，将明显影响立传立转