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QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书-博奥龙免疫.PDF
QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书
QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书
产品描述
QuickShuttle系列转染试剂是一类具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试
剂,具有高效、低毒和易于使用等优点。QuickShuttle 区别于常规转染试剂的两个最主要
特点是:(1)可以在细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);(2)转染操作
可在一分钟内完成。因此,QuickShuttle特别适合用于快速大量制备高滴度的各种病毒载
体和假病毒载体。
重要提示
1. 与常规转染试剂不同,使用QuickShuttle可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染(立
传立转),从而可节省 1 ~24小时的转染前细胞培养时间。
2. QuickShuttle极大简化了转染操作,转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育,可直接
加入含血清的细胞培养基中进行转染,而且无需在转染后补加血清或更换培养基,整
个转染操作可在一分钟内完成。
3. 立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得QuickShuttle特别适合用于快
速大量制备高滴度的各种病毒载体和假病毒载体。
4. QuickShuttle能够用于慢病毒、逆转录病毒、腺相关病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒、流
感假病毒和人乳头瘤假病毒等各种病毒载体和假病毒载体的制备。
5. QuickShuttle经过DMEM RPMI-1640和M199等常规培养基测试,虽然在实验中推荐
DMEM M199 QuickShuttle Vero
使用 ,但有实验结果表明 能够显著增强 对 细胞和
293FT细胞的转染效果,因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。
6. 为了方便操作,推荐在75cm 和175cm 细胞瓶中使用QuickShuttle制备各种病毒载体2 2
和假病毒载体。备注:不推荐使用各种细胞板和培养皿。
7. QuickShuttle转染试剂建议常温运输,2~ ºC保存(在-30ºC到常温范围内均可长时间
稳定保存),无菌取用,有效期1 个月。
北京博奥龙免疫技术有限公司 第 1 共 6 Tel:010
QQ:473644017
QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书
名称:QuickShuttle-293
(293细胞专用QuickShuttle转染试剂)
货号:KX0110044
含量:0. ml
用途:用于转染各种293细胞制备病毒载体和假病毒载体。
注意事项:
1. 质粒DNA:请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒DNA。
2. 0.85% W/V
稀释液: ( )生理盐水,用低内毒素纯水配制,高压消毒或除菌过滤。
3. 培养基:经过DMEM RPMI-1640和M199等常规培养基测试,推荐使用含5~10%牛
血清的DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。
4. 对于75cm 细胞瓶,推荐每瓶培养基用量为20ml、质粒DNA用量为40µg、转染试剂2
用量为80µl;对于175cm 细胞瓶,推荐每瓶培养基用量为45ml、质粒DNA用量为2
90µg、转染试剂用量为180µl。质粒DNA和转染试剂用量可在正式实验前根据不同细
胞和不同培养基用报告基因在推荐用量附近进行优化。
5. 在不同尺寸细胞瓶中进行转染,培养基、质粒DNA和转染试剂三者用量比例保持不
变。在适当减少培养基用量 (不少于推荐用量的一半)前提下,可按比例节约质粒
DNA和转染试剂用量。
6. 对于共转染,质粒DNA 总量按上述推荐量,但不同质粒DNA 的比例应根据不同质粒
的作用并通过预实验确定。
7. 可使用本试剂进行立传立转和标准转染(即细胞传代18~24小时后进行转染)。
8. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞,即细胞生长至80-90%成片或刚长满。若使用生长
过老的细胞,将明显影响立传立转
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