中国明对虾精氨酸激酶与白斑综合征病毒结构蛋白VP31的.PDFVIP

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2017-10-02 发布于江苏
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中国明对虾精氨酸激酶与白斑综合征病毒结构蛋白VP31的.PDF

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中国明对虾精氨酸激酶与白斑综合征病毒结构蛋白VP31的

中国明对虾精氨酸激酶与白斑综合征病毒结构蛋白 VP31 的作用初探 1, 2 2 2 2 1 2 刘超 , 赵培 , 梁艳 , 高强, 刘升平 , 黄倢 (1. , 266000; 2. , 266071) 摘要: 白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)是危害对虾的主要病原, 给全球水产养殖业带来了巨大经济损失。为研究阻断WSSV 的途径, 前期研究WSSV 与宿主相结合的受体蛋白发现, 白斑综合征病毒囊膜蛋白VP31 可以与中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)精氨酸激酶(FcAK)发生结合作用。精氨酸激酶(AK)通过调节无脊椎动物体内磷酸精氨酸与三磷酸腺苷(ATP)之间平衡在能量代谢、储存和利用方面具有重要作用。作者通过重组表达的rFcAK 与rVP31 的far-Western blotting 分析, 证实两者有结合作用, 此外, rFcAK 还与WSSV 的VP19 、VP28 等6 种结构蛋白有结合作用。双向电泳分析观察到, rFcAK 与rVP31 的磷酸化反应后, rVP31 部分发生pI 降低现象, 提示rVP31 可能发生了磷酸化。生物信息学分析表明VP31 存在21 个精氨酸残基, FcAK 具有 12 个精氨酸结合位点, 这可能为VP31 和FcAK 的结合活性提供了靶位。为进一步研究WSSV 与宿主结合机理及阻断感染的机制提供思路。关键词: 精氨酸激酶(AK); 白斑综合征病毒(WSSV); 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis); 结合中图分类号: S917.4 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2014)03-0104-07 doi: 10.11759/hykx20120702003 (white spot syndrome virus, 1 材料和方法 WSSV)1992 , [1-6] 1.1 病毒和表达菌株 WSSV , 5 WSSV , 4.810 /μL, WSSV [7-8] 80℃WSSV vp31 AK (AK) (Fcak)pET30a-vp31 pET30a-fcak E. , (ATP) coli BL21 ( ), , , (ADP), 6×His ATP 1.2 rVP31 和rFcAK 的分别表达及产物纯化 [9-11] [12-13] AK [14] [15-23] [24] [25] 80℃pET30a-vp31