成人骨髓间质干细胞定向诱导为脂肪细胞的研究＊.PDFVIP

维普资讯 · 598 · 中国病理生理杂志 ChineseJoumal0fPathophysiolo~ 2001，17(7)：598—601 [文章编号】 1000—4718(2001)07一O598一o4 成人骨髓间质干细胞定 向诱导为脂肪细胞 的研究* 项 鹏 ， 张丽蓉 ， 陈振光 ，夏文杰 ， 张秀明 ， 李 艳 ， 李树浓 “ (中山医科大学病理生理教研室 ，广东 广州510080；广东药学院病理生理教研室，广东 广州510224； 中山医科大学附属第一医院心胸外科 ，广东 广州 510080) [摘 要] 目的：体外定向诱导成人骨髓间质干细胞(MSC)分化为脂肪细胞。方法：采用Fjoou—Paque淋巴细 胞分离液 (1．077×103g／L)离心分离成人 MSC，体外扩增，流式细胞仪检测 MSC表面抗原表达，地塞米松、IBMX、胰岛 素、 ill定向诱导MSC分化为脂肪细胞。油红 O检测中性脂肪 ，光镜下细胞计数。结果：成人骨髓 间质干细 胞在体外扩增5代可获得 1×10s个细胞。流式细胞仪检测结果显示 CD29、CD44、CDg0、CD105、CD166表达阳性， CD14、CD34、CD45、CD11a为阴性。诱导48h后 ，细胞 内有脂滴出现，随着时间延长 ，脂滴逐渐增加并融合为脂泡。细 胞由梭形转变为圆形或多角性。细胞计数结果显示85％以上细胞转变为脂肪细胞。结论 ：成人骨髓间质干细胞在 体外可以分化为脂肪细胞。 [主题词] 骨髓；干细胞；脂肪组织；肥胖症 [中圈分类号] R329．2 [文献标识码] A 近年来研究发现，除了胚胎干细胞，机体内还存 2 试剂 在一些组织干细胞 ，它们具有一定 的 自我更新和分 H—DMEM、L—DMEM培养基(Gibc0BRL公司)， 化能力 。如来源于脑室管膜 的神经干细胞可分化为 胎牛血清(Hyclone公司)、Fic0u—Paque分离液(1．077 神经元和神经胶质细胞…；骨髓 中的造血干细胞可 ×103g／L， Pharmacia公司)，地塞米松 (dexametha． 分化为多种造血细胞；在骨髓 中还存在一种间质干 sone)、3一异丁基 一1一甲基黄嘌呤(3一isobutyl一1一 细胞 (mesenchymalstem cell，MSC)，它 最初 是 由 methyl—xanthine，IBM)()、消炎痛 (indomethacin)(Sig- Friedenstein发现的一类易于贴附于塑料培养板表面 nla公司)，牛胰岛素 (Calbiochem公司)，荧光标记小 的细胞 2，后来的研究证实，MSC具有多向分化的潜 鼠抗 人抗体 CD29一PE、CD44一ⅡI℃、CD90一PE、 能，如成骨细胞、成软骨细胞、肌 肉细胞、神经细胞 CD105一FrI℃、CD166一FrI℃、CD1la—FrI℃、CD14一 等 3【,4J。随着人民生活水平的提高，肥胖的发生率也 PE、CD34一PE、CD45一ⅡI℃(啪U公司)。 逐渐增加，由此而带来的心血管疾病、糖尿病、胆石 3 方法 症的发病率也呈上升趋势。肥胖 的发生主要是 由于 3．1 MSC的分离 【J 无菌条件下，用含 10％的FCS 脂肪细胞的数 目增加和体积增大，但其 中的机制 目 的H—DMEM 冲出骨髓，充分混匀，转入离心管， 前尚不完全清楚。研究证 明’，脂肪细胞来源于脂肪 1500r／min离心 10min，弃上清及脂肪层 ，沉淀用 前体细胞，而脂肪前体细胞又是 由间质干细胞分化