斑节对虾亲环素AcyclophilinA基因的克隆及启动子-中国水产科学.PDFVIP

第16卷第3期 中国水产科学 Vol.16 No.3 2 0 0 9 年 5 月 Journal of Fishery Sciences of China M a y 2 0 0 9 斑节对虾亲环素A （cyclophilinA）基因的克隆及启动子序列分析 1，2 1 1 1 1 1 1 王卫芳 ，邱丽华 ，黄建华 ，张殿昌 ，苏天风 ，杨其彬 ，江世贵 （1．中国水产科学研究院 南海水产研究所，广东 广州 510300；2. 华南农业大学 动物科学院，广东 广州510642） 摘要： 通过同源克隆和RACE技术获得斑节对虾（ ）亲环素A（cyclophilin A，CYPA）的cDNA序列。根据已 Penaeus monodon 克隆的cDNA序列设计引物，利用染色体步移技术（Genomic DNA walking）从斑节对虾卵巢组织中克隆了CYPA 基因的启 动子和基因组DNA序列。测序结果表明，斑节对虾亲环素A （PmCYPA） cDNA全长834 bp，其中开放阅读框（open reading frame，ORF）为495 bp，可编码164个氨基酸；5’非编码区为31 bp，3’非编码区为308 bp。从斑节对虾基因组文库中扩增 的CYPA基因组DNA全长3 181 bp，其中包括启动子区域1 173 bp，1个内含子426 bp，2个外显子序列：分别为101 bp和399 bp。在5’UTR上游区域有明显的启动子序列，包含一个GC盒和2个CAAT盒，同时还包含AP1、CRE等调控元件，符合真核 [ 生物典型的启动子特征。分析基因的结构表明所克隆的PmCYPA符合PPlase家族成员特征，属于此基因家族成员。 中国 水产科学，2009，16（3）：324-331] 关键词：斑节对虾；cyclophilinA基因；克隆；启动子；序列分析 中图分类号：Q959　　　　　　　文献标识码：A　　　　　　文章编号：1005-8737-（2009）03-0324-08 CYPA是一类具有肽基脯氨酰顺反异构酶（peptidy- 节细胞内信号转导等作用。 prolylcis-trans isomerase，PPlase）活性的高度保守蛋 CYP基因最早是在人类中发现并认证的，目前 [ ] [ ] 白质 1-2 ，可结合细胞内蛋白质并加速它们的折叠、装 对人亲环素（hCYP）的研究也最为广泛 7 ，其功能大 [ ] 配与转运，起分子伴侣作用 3 。它在细胞内不仅能 都集中在作为环孢霉素A受体作用于T细胞所发挥 与环孢酶素A（cyclosporine A，CsA ）结合，参与免疫 的免疫抑制作用方面。近年来随着研究的不断深入，