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血小板聚集功能检测及临床应用
血小板聚集功能的检测及
血小板聚集功能的检测及
临床应用
临床应用
广东省人民医院
广东省人民医院
广东省医学科学院
广东省医学科学院
病理医学部检验科
病理医学部检验科
李广华
李广华
前 言
血小板聚集功能的检测对于抗血小板药物
的疗效监测,出血性疾病的鉴别和诊断以
及对血栓性疾病的监测都具有重要的意义。
Born于1962年首先应用比浊法检测血小板
聚集功能,该技术是测定血小板聚集功能
的经典方法 ,应用最为广泛 。
血小板的聚集是由各种诱导剂与血小板膜受体之
间的相互作用而诱发的:这种相互作用通过膜的
传递而激活血小板,使其膜表面另一个糖蛋白
IIb/IIIa受体活化,再与血浆中的纤维蛋白原结合,介
导血小板聚集。(三要素:GPIIb-IIIa和钙离子、
纤维蛋白原)
目前认为有三条途径:
1.ADP途径,ADP 、胶原、凝血酶、肾上腺素等
均可诱导血小板释放内源性ADP 。后者可引起血
小板聚集。
2.TXA2途径:PGG2、PGH2及TXA2可诱导血小
板发生聚集反应,但不依赖ADP途径。
3.PAF途径:PAF通过与血小板膜上的PAF受体
结合而发挥作用,引起血小板聚集。
目前血小板聚集功能的检测已经从传统的
手工法发展到全自动仪器的检测,从单一的
比浊法发展到阻抗法,剪切法,流式细胞术法、
模拟体内初期止血(PFA-100 )等等, 从单
一的测定血小板聚集功能发展到能同时检
测血小板释放ATP和血小板内Ca2+的含
量,血小板释放颗粒及活化功能的测定,
AA代谢产物测定,血小板内环腺苷酸
( cAMP)和环鸟苷酸 ( cGMP)测定,血小板
活化的新标志物等等。
原理(比浊法)
将富血小板血浆(PRP)置于比色管中,加入
诱聚剂(主要有ADP 、肾上腺素,胶原,凝血
酶、花生四烯酸、TXA2,PAF等),用一涂硅
的小磁粒进行搅拌,血小板逐渐聚集,血浆浊
度降低,透光度增加,记录此变化,形成血小板
聚集的动态曲线,以PRP的聚集率和透光度
为0%,乏血小板血浆(PPP)所测得的聚集率
和透光度为100%,用血小板聚集仪进行自动
测定、记录、描绘血小板聚集曲线。
不同诱导剂可产生不同类型的血小板聚集曲线:
ADP诱导血小板聚集在低浓度时(3umol/L)是可
逆性聚集,即初期聚集波、还能引起血小板释放
ADP 而产生第2个聚集波;在高浓度时(3ugmol/L)
是不可逆性聚集。可使全部血小板对外源性ADP
产生反应而立即得到1个单一的聚集波;
适当浓度的肾上腺素亦可引双聚集波曲线,胶原引
起的聚集曲线与ADP和肾上腺素不同,不能直接聚
集血小板,而是引起血小板内释放ADP等诱导聚
集;
瑞斯托霉素与vWF相互作用引起血小板GPIIb/IIIa
受体激活而导致小板聚集。
血小板聚集试验(阻抗法)
原理 可用全血或PRP进行检测。检测杯中
有一对铂电极,血小板在诱导剂的诱导下发
生聚集时,可覆盖在铂电极表面,导致电阻
抗的改变,后者的变化程度与聚集程度有关。
此信号经过放大传送到监测器或计算机上进
行处理,将电阻抗的改变转换为聚集曲线从
而计算出血小板的聚集率。
阻抗法的优点
直接使用全血
全血中的其他血细胞同时存在,从而真正模拟
了体内的生理环境
保存全部血小板,避免部分血小板因体积太大
而在制备PRP时丢失
对于脂血标本的检测,可以克服光学法检测时
因过于浑浊而影响结果
全血电阻聚集仪与光学法相比,检测高凝状态
时的血小板功能更为敏感
阻抗法的不足之处
光学聚集仪耗时,对小聚集物的形成不敏
感,,操作相对烦琐。
阻抗法与比浊法的结果无法换算。
尚缺乏大量应用的经验。
血小板功能分析仪( PFA-100)
这是近年才出现的新仪器 , 目前PFA-100系统是
血细胞功能检测研究最多
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