单克隆抗体综.docVIP

单克隆抗体综述 目录： 抗体的定义和第一代单克隆抗体（经杂交瘤细胞生产） 第二代单克隆抗体：经过基因重组的嵌合或人源化单克隆抗体 噬菌体展示抗体和全人抗体 世界上现有单克隆抗体种类以及治癌药品 抗表皮生长因子受体单克隆抗体和其他小分子情况 总结 附录（国内的单抗同行或竞争对手） 一、抗体的定义和第一代单克隆抗体（经杂交瘤细胞生产） 抗体是在对抗原刺激的免疫应答中，B淋巴细胞产生的一类糖蛋白。它是能与相应抗原特异的结合、产生各种免疫效应（生理效应）的球蛋白。国际卫生组织将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的一类蛋白统一命名为免疫球蛋白，它与抗体都是指同一类蛋白质。 抗体的基本结构如图所示，由四条肽链组成，其中两条相对分子质量较低的肽链约含210个氨基酸残基，相对分子质量约24000，称为“轻链”（L链）；另两条相对分子量较高的肽链约含450(550个氨基酸残基，相对分子质量在55000(70000之间，称为“重链”（H链）。轻、重链之间和两重链之间由二硫桥连接，这样的四链结构（L2H2）组成一个免疫球蛋白分子。 N 轻链 重链 C 抗体4条肽链结构示意图 以重链抗原性差异来进行抗体的血清学分类：用分离纯化的各种重链免疫动物获得相应的抗血清，再通过免疫交叉反应等血清学检测方法，分析其结构的异同，反复的验证，最后发现人类有5类不同的重链，分别为(、(、(、(、(，其相应的抗体分别命名为IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。 IgG占成人血清中抗体总量的75%以上，是人类血清中主要的一类抗体，由B细胞产生，其功能结构也是研究最清楚的。它主要的生理功能有：(1)中和毒素和病毒，(2)凝集和沉淀抗原，(3)激活补体，(4)通过特异的膜受体（Fc(）与多种细胞结合，(5)可能造成免疫损伤。 单克隆抗体技术的应用是现代生物科学领域中的重要进展之一。单克隆抗体（Monoclonal antibody，简称McAb）具有广泛的应用价值，它为生物学和医学等自然科学的研究开辟了新的途经。 1975年K?hler和Milstein将小鼠骨髓瘤细胞与用绵羊红细胞免疫小鼠后的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既能产生抗绵羊红细胞抗体，又能进行分裂繁殖，创立了单克隆抗体杂交瘤技术。单克隆抗体指在一株B淋巴细胞系中的每个细胞只能产生一种它所专有的、针对一种它识别的抗原决定簇的抗体，从这样一株B细胞系产生的抗体即为单克隆抗体。 融合 HAT B淋巴细胞（脾） 培养液 瘤细胞（细胞培养） 未融合的B细胞 未融合的瘤细胞 （死亡） 融合的杂交细胞 （死亡） （存活） 第二代单克隆抗体：经过基因重组的嵌合或人源化单克隆抗体 嵌合抗体：指用人的恒定区取代小鼠的恒定区，保留鼠单抗的可变区序列，形成一个人-鼠杂合的抗体。其研制程序快，可大幅度降低异源抗体的免疫原性，却几乎保持亲本鼠单抗全部的特异性和亲和力。另外，它还具有人抗体的效应功能，如补体固定、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCC）等。嵌合抗体成功的例子有： Rituxan：Idec Pharmaceutical/Genentech的小鼠抗CD20抗体，含人IgG1κ恒定区，用于治疗B淋巴瘤。它的抗淋巴瘤作用主要可能来自于补体作用、ADCC和诱导肿瘤细胞凋亡。 Remicade：Centocor公司的抗TNF-α抗体，用于治疗风湿性关节炎和节段性回肠炎。 Simulect: Novartis公司的抗CD25抗体，用于抗移植排斥。 Erbitux 人源化抗体：利用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体，取其与抗原直接接触的那段抗体片段（互补决定区，CDR）与人的抗体框架嫁接，经亲和力重塑，可维持其特异性和大部分的亲和力，同时几乎去除免疫原性和毒副作用。成功的例子： Herceptin：Genentech公司的抗HER2/neu抗体，用于治疗乳腺癌。 Synsgis：Medimmune公司的抗F抗体，用于治疗呼吸道病毒感染。 Zenapax：Protein Design Labs（PDL）/Roche的抗CD25抗体，用于抗移植排斥。 h-R3 噬菌体展示抗体和全人抗体 人源性抗体：虽然人源化抗体解决了最重要的问题--鼠抗体的免疫原性，但它有本身难以克服的困难：人源化过程繁复、昂贵，需大量的电脑模拟，有很大一部分工作是摸着石子过河（因需取代不同的氨基酸以恢复选择性和亲和力）；而且它总还含有少量鼠源性成分。目前最热门的是完全的人源性抗体，它主要通过两种途径来研制。这两种主要的人抗体制备技术竞争至今，孰优孰劣尚未可知。（1）噬菌体显示技术制备人源性抗体 基于噬菌体可把抗体片段表