多胺对PC12细胞生长和信号转导影响.pdfVIP

多胺对PCI2细胞生长和信号转导的影响 第一部分 第一部分多胺及其抑制剂对PCI2细胞生长的影响 胺类物质，包括腐fJ安(putrescine，Pu)， 中鸟氨酸脱羧酶(omithine 乙酞转移酶 乙酰转移酶 审厂、磊订厂丽磊了]精脒合成酶 I◆ 精胺合成酶 腐胺—◆精脒 一 -耩胺 骢酸≮ +CHl+CH， ∞队M 一+ 枷叱 SAM 圹枷 图I-I多胺代谢途径 虽然在生物体内含量不高，却是微生物、动物及人体合成核酸、蛋白质所需的一种调 控物质，在细胞生长、增殖和蛋白、核酸合成过程中起着非常重要的作用It,2]。天然 的多胺对于神经系统发育和成熟具有很多生理作用(包括离子通道的调节和钙依赖递 质的释放等)13-5】，同时多胺系统也参与了一系列神经系统的病理过程，如癫痫发作、 中风、老年痴呆、脑缺血、脑肿瘤等16-101。 PCI2细胞是从大鼠嗜铬细胞瘤中分离得到的细胞株…。常规条件下，该细胞株 性质与肾上腺嗜铬细胞相似，当用神经生长因子或其它一些物质处理分化后，又具有 神经元的特性和功能。PCI2细胞能合成、储存并释放适量的儿茶酚胺等物质，具有L 一型和N一型钙通道的特性，由于这些特点，PCI2细胞株已成为神经生物学研究的广泛 应用的细胞模型【Ⅲ51。 有关多胺对生物影响的研究，包括对神经系统生理和病理的作用，有很多是通 过动物体内模型研究的，但是多胺系统对离体细胞尤其是离体神经元细胞的研究甚 少。本实验采用PCI2细胞为神经元细胞模型，研究多胺IODC系统对神经细胞增殖 和抑制作用的剂量效应。 多胺对PCI2细胞生长和信号转导的影响 第一部分 材料与方法 (一)主要仪器： (1)二氧化碳培养箱 Napc05410，美国 (2)倒置显微镜 Olympus．日本 (3)普通台式离心机 Model 80—1，上海手术仪器厂 (4)酶标测定仪 Biorad公司 EPICS (5)流式细胞仪 XL，CoulterCO，USA (二)主要试剂 (1)精脒 SIGMA公司产品(生产批号：D193) (2)Dn蛭O SIGMA公司产品(生产批号：$4139) (3)RPMI--1640GIBCOBRL产品 (4)小牛血清 上海华美生物公司产品 (5)MTT SIGMA公司产品 (6)台盼蓝 国产分析纯 (三)实验材料 大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PCI2)：由苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室保 次，6．7天传代，当细胞长满汇合后，以l：2—1：3的比例进行传代培养。取对数生 长期细胞用于实验。 组2：全培分别换以含2，4，6，8mmol／LDFMO的培养液；对照组：全培条件下的 正常PCI2细胞。