第四章色谱定性与定量分析-精简.pptVIP

*;*;*;5、保留值 1)、 死时间t0 不被固定相吸附物质进样-出峰极大值时间称，它正比于色谱柱的空隙体积。 2)、保留时间tr 试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间，保留时间是色谱法定性的基本依据，如下图。 3)、 调整保留时间tr′ 组分的保留时间扣除死时间后，称为该组分的调整保留时间，即 tr′= tr ? t0 。 ;*;*;*;*;*;*;第二节、定性定量分析方法;1. 保留时间定性　　相同色谱下，未知物t与标准物质相同，初步认为同一物质。为提高可靠性，可进一步改变色谱条件（分离柱、流动相、柱温等），如果被测物的保留时间仍然与标准物质一致，则可认为它们为同一物质。;2. 利用不同检测方法定性　　如果待测组分---标准物,不同检测器有相同响应行为，初步判断同一种物质。在液相色谱中，还可通过二极管阵列检测器比较两个峰的紫外光谱图。;3、加入已知物增加峰高法 当未知样品中组分较多，所得色谱峰过密，用上述方法不易辨认时，或仅作未知样品指定项目分析时均可用此法。 首先作出未知样品的色谱图，然后在未知样品加入某已知物，又得到一个色谱图。峰高增加的组分即可能为这种已知物。 ;4. 柱前或柱后化学反应定性　　柱后反应定性,也可在进样前反应生成新的衍生物，该化合物在色谱图上的出峰位置或峰的大小就会发生变化甚至不被检测。;1、校正因子 相同含量的不同物质，即使在同一检测器上产生的信号也不同，故引入校正因子。是定量计算公式中的比例常数，是单位面积所代表的被测组分的量。 可用下式表示： Mi–组分的量；fi– 组分的校正因子；Ai–组分的峰面积 ;2、归一化法(Normalized %); 特点及要求： 归一化法简便、准确； 进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大； 仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。 LC两种误差情况1）分析时选定有效成分的最大吸收波长，由于杂质不同结构，其最大吸收波长不同，造成归一误差。2）当杂质无紫外吸收时，HPLC结果中误差较大。;3、外标法（External Standard)，又称校正曲线法;*;样品中加???内标物，利用被测物与内标物校正因子的比值不变来进行定量的。 首先用被测物标准品和内标物配制标准溶液，求得校正因子比值： 然后，再由它和样品的峰面积来计算： Fis＝fi/fs －内标物与被测组份校正因子的比值； mi－被测组份i的含量；ms－加入内标物的量 As－内标物的峰面积； Ai－组份I的峰面积； ;内标物的要求： （a）试样中不含有该物质； （b）与被测组分性质比较接近；能与样品完全互溶； （c）不与试样发生化学反应； （d）与被测组份很好分离，出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。 (e) 加入内标的量要接近被测组份。;(三)、仪器性能及其表征 问题：如何判断哪种仪器分析方法可用于解决某个分 析问题呢？ ? 基于以上问题，你必须了解该仪器的性能，或者说，该仪器到底可作什么分析！ ;1、精密度（Precision） 使用同一方法或步骤进行多次重复测量所得分析数据之间符合的程度 标准偏差(Absolute standard deviation)，s 平均标准偏差(Standard deviation of mean, sm) 相对标准偏差(Relative standard deviation, RSD)，又称变异系数(CV) l;;3、检出限（Detection limit） 检测限：在置信水平，可以检测到的待测物的最 小质量或浓度。只有当有用的信号大于噪音信号时，仪器才有可能识别有用信号，如下图所示。 ; ; 不同的组分的线性范围不同。不同类型检测器的线性范围差别也很大。如氢焰检测器的线性范围可达107，热导检测器则在105左右。;农药原药与制剂分析方法的确认准则 (Guidelines on method validation of Analytical methods for Agrochemicals of their formulations)确证内容1、方法中被分析物质(及内标物)响应线性2、精密度评价3、准确度证明4、无干扰物证明5、被测定物质种类的确定;方法的确证;方法的确证;方法的确证