丙酸梭菌简易培养及电转化方法.PDF

第 卷第 期 生 物 加 工 过 程 年 月 丙酸梭菌简易培养及电转化方法 王晨飞王凤寰田平芳谭天伟 北京化工大学 生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室北京 摘 要 建立了一种简易的丙酸梭菌 厌氧培养方法 输液瓶蜡封法 从而使厌氧培养快 速有效 基于输液瓶蜡封法 采用电击缓冲液 结合 维生素 的方法 通过对不同对数生长期的菌 体细胞进行实验在无需借助厌氧培养箱的条件下成功地将外源质粒 转化丙酸梭菌结果表明 处于对数生长中期 的丙酸梭菌细胞最适宜用于电转化 该研究为严格厌氧微生物的培养提供了一种普适 的方法并且为丙酸梭菌的分子生物学操作奠定了一定的基础 关键词 厌氧培养 丙酸梭菌 电转化 对数生长期 中图分类号 文献标志码文章编号 丙烯酸是一种重要的化工原料广泛应用于涂 制取丙烯酸方面受到特别关注 丙酸梭菌为专性 料化纤纺织等行业 随着化石燃料资源的日益 厌氧梭状芽孢杆菌 生长后期形成芽孢 其培养和 枯竭依赖于石油资源的各种化学品价格日趋上 电转化均需借助厌氧培养箱等设备 操作过程十分 丙烯酸即是其中一种 因此 目前用可再生 繁琐 另外丙酸梭菌是革兰氏阳性菌细胞壁较 升 生物原料制取丙烯酸受到了广泛关注 丙酸梭 厚到目前为止尚未有关于丙酸梭菌电转化方法 菌 自 被发现以来 的相关报道 一直未得到深入研究与广泛应用但由于其具有与 本研究建立一种简易的厌氧培养方法输 在生物法 液瓶蜡封法 以确立基于该培养方法的丙酸梭菌电 丙烯酸生物合成相关的特殊代谢途径 收稿日期 基金项目国家重点基础研究发展计划 计划资助项目 国家自然科学基金资助项目 作者简介王晨飞 女浙江新昌人硕士研究生研究方向微生物基因工程及代谢调控谭天伟联系人 教授 生物加工过程 第 卷 转化可行条件较大程度上简化丙酸梭菌的培养和 个月 遗传转化工作 为利用丙酸梭菌生产生物基丙烯酸 丙酸梭菌芽孢的萌发和培养