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第十三章 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 第一节 核酸的酶促降解 核 酸 酶 外切核酸酶对核酸的水解位点 内切核酸酶对RNA的水解位点示意图 限制性内切酶 常用的DNA限制性内切酶的专一性 限制性内切酶类型 限制性内切酶的命名 限制性内切酶的意义 限制片段的长度 限制图的定义和构建 SV-40基因组限制性酶谱 末端标记法绘制物理图谱 限制性内切酶解法 第二节 核苷酸的降解 嘌呤的分解及“痛风症”产生和治疗 嘧啶的分解 第三节 核苷酸的合成代谢 核糖核苷酸的生物合成 嘌呤环上各原子的来源 IMP的 生物合成 IMP转变为GMP和AMP 嘌呤核苷酸合成补救途径（自学） 嘧啶核苷酸从头合成途径 嘧啶环上各原子的来源 尿嘧啶核苷酸合成途径 嘧啶核苷酸补救合成途径（自学） 脱氧核苷酸的合成 硫氧还蛋白参与的核糖核苷酸的还原反应 核糖核苷酸的还原反应 核糖核苷酸还原酶示意图 脱氧胸腺嘧啶核苷酸的合成 核苷酸合成前体类似物与抗癌、抗菌药物 5-氟脱氧脲嘧啶核苷酸作为胸苷酸合成酶自杀性底物的机理 叶酸和 四氢叶酸（FH4） 一碳基团的来源与转变 核苷酸的合成及相互关系 底物特异性调节位点 酶活性 调节位点 催化部位 B1亚基 B2亚基 胸腺嘧啶核苷酸合成酶 NADPH+H++Ser NADP++Gly N5、N10—CH2 — FH4 FH2 二氢叶酸还原酶 Ser羟甲基转移酶 O N HN O dR-P CH3 O N HN O dR-P 根据酶的抑制原理，在癌症的化学治疗或抗菌治疗中，往往选用一些底物类似物（抗代谢物）抑制胸苷酸合成酶或二氢叶酸合成酶的合成，使胸苷酸不能合成，例如： 1、氨基蝶呤、氨甲蝶呤、三甲氧苄氨嘧啶为叶酸类似物，是二氢叶酸还原酶抑制剂，可抑制癌细胞和细菌生长； 2、5ˊ-氟脲嘧啶、 5ˊ -氟脱氧脲嘧啶在体内可转化为5-氟脱氧脲嘧啶核苷酸为脱氧胸腺嘧啶核苷酸类似物，是脱氧胸腺嘧啶核苷酸合成酶的自杀性抑制剂（suicide inhibitor） ，可作为抗癌药物。 F O N HN O dR-P S-酶 F O N HN O dR-P H S-酶 F O N HN O dR-P H CH2-FH4 胸苷酸合成酶、5-氟脱氧脲嘧啶核苷酸和亚甲基四氢叶酸三元复合物的形成 叶酸 四氢叶酸 H H 10 5 N5，N10-CH2-FH4 N5-CHO-FH4 CH2 CHO 本章讨论核酸酶的类别和特点，对核苷酸的生物合成和分解代谢作一般介绍。 第一节 核酸的酶促降解 第三节 核苷酸的合成代谢 第二节 核苷酸的分解代谢 核苷酸酶 核苷磷酸解酶 核酸 核苷酸 核苷 碱基+核糖-1-P 磷酸 核酸酶 核苷水解酶 碱基+核糖 脱氧核糖核酸酶(DNase) 核糖核酸酶(RNase) 非特异性核酸酶 1、核酸酶的分类 （1）根据对底物的 专一性分为 （2）根据切割位点分为 核酸内切酶 核酸外切酶 2、核酸酶的特异性 3、限制性内切酶 5′ p p p p OH B p p p p 3′ B B B B B B B 牛脾磷酸二酯酶（ 5′端外切5得3） 蛇毒磷酸二酯酶（ 3′端外切3得5） 5′ p p p p OH Py Pu Py Py 1′ p p p G A C U p p p G A 3′ RNAase I RNAase I RNAase T1 RNAase T1 Pu ：嘌呤 Py：嘧啶 ? 类型 ? 命名和意义 限制片段的长度 限制图 原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类酶称为限制性内切酶（ristriction endonuclease）。 酶 辨认的序列和切口 说明 ‥ ‥A G C T ‥‥ ‥ ‥T C G A ‥ ‥ ‥ ‥G G A T C C ‥‥ ‥ ‥C C T A G G ‥‥ ‥ ‥A G A T C T ‥‥ ‥ ‥T C T A G A ‥‥ ‥ ‥G A A T T C ‥‥ ‥ ‥C T T A A G ‥‥ ‥ ‥A A G C T T‥‥ ‥ ‥T T C G A A ‥‥ ‥ ‥G T C G A C ‥‥ ‥ ‥C A G C T G