基于指示剂置换法利用紫外-可见光谱和比色检测水溶液中的半胱氨酸.pdfVIP

V01．33 高等学校化学学报 No．6 OF 2012年6月 CHKMICALJOURNALCIIINESFUNIVERSITIES 1158一1161 基于指示剂置换法利用紫外-可见光谱和 比色检测水溶液中的半胱氨酸 李咏玲1”，张建刚2…，卫艳丽3，程芳琴1 (1．山西大学资源与环境工程研究所，太原030006；2．山西农业大学文理学院， 太谷03080l；3．山西大学化学化工学院。太原030006) 摘要基于半胱氨酸(cys)与二价铜离子的配位作用，发展了一种在纯水溶液中以4一(2一吡啶偶氮)间苯二酚 (PAR)为指示剂，通过紫外一可见光谱定性定量检测半胱氨酸的方法．研究发现，在pH=7．O的含有PAR和 二价铜离子(摩尔比为l：I)的缓冲溶液中，当加入半胱氨酸后。由于配位竞争使PAR释放出来，实现了对 半胱氨酸的识别，选择性研究结果表明，其它氨基酸不干扰体系对半胱氨酸的测定．通过紫外一可见光谱 酸的线性关系变化范围为O～240“moL，L，占=7519L／(moJ．cm)，线性相关系数为O．9982．在检测过程中可 观察到溶液颜色由桃红色变成了黄色． 关键词指示剂置换法；二价铜离子；4一(2一吡啶偶氮)间苯二酚；半胱氨酸；紫外一可见光谱 中图分类号0657．32 文献标识码A DOI：10．3969／j．issn．025l旬790．2012．06．007 半胱氨酸(cys)是一种重要的硫代化合物氨摹酸，参与包括蛋白质的合成、解毒和代谢等多种重 要的生理功能；许多疾病的发生都和半胱氨酸有关，如肾功能衰竭、艾滋病、老年痴呆症、帕金森病、 动脉心血管硬化、神经管缺陷及冠心病等。1“1．因此，建立一种快速、准确、灵敏的检测半胱氨酸的方 法具有重要意义，也是预防和监测由半胱氨酸所引发疾病的重要途径．在过去的数十年中，光学检测 法的研究较为活跃，如电化学法’61、流动注射分析法川、高效液相色谱法哺1、质谱分辨仪∽。…、酶法 及荧光方法¨‘’121等，但大多数半胱氨酸的光学检测方法需利用巯基高亲核反应或过渡金属对巯基的亲 和力构建，其中涉及探针和半胱氨酸之问的特异反应，如Michael加成。13’“J、醛的环化11}”1、磺酸酯 的硫解¨7，18J、磺胺类药物和二硝基苯甲醚¨虬驯、硒氮键的裂解【2h圳等．但是，上述方法要么需要昂贵 的仪器、复杂的有机合成操作技术，要么需在有机或半水溶性相态进行测定，易造成环境污染和健康 危害．因此，亟待开发一种选择件和灵敏度高，快速且环保的枪测方法．最近，基于指示剂和分析物问 竞争机制的指示剂置换法得到了较多的关注旧。1．鉴于半胱氨酸与二价铜离子的配位作用强于4一(2一 吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)，可夺取与PAR配位的二价铜离子，使PAR得以释放回到游离状态，恢复 其颜色及光谱特性．我们利用半胱氨酸和PAR对二价铜离子的配位竞争机理，建立了一种在水溶液中 检测半胱氨酸的方法，该方法快速、准确，且肉眼可见． 1 实验部分 1．1试剂与仪器 (PAR)购于上海试剂三厂；cucl：和其它阳离子试剂均为分析纯(天津市天大化工实验厂)；所用溶液 均用去离子水配制． 收稿日期：2012旬l-13． 基金项目：中国博士后科学基金(批准号：20l104611)和山西省青年科技基金(批准号：2010021010_2)资助． 联系人简介：程芳琴，女，博士．教授．博士生导师．主要从事化学与环境工程研究．E一№il：c陆啊in@Ⅲ．edu．cn 李咏玲等：基于指示荆置换法利用紫外一可见光谱和比色检测水溶液中的半胱氨酸 (上海求精生化试剂仪器有限公司)；P0．120石英比色皿(宜兴市晶科光学仪器有限公司)． 1．2实验过程 mmoL／L 向含有20斗moL／LPAR，20斗m彬LcuCl2和lO 的比色皿中逐渐滴加半胱氨酸溶液，同时采用紫外．可见分光光度仪检测，当体系的吸收峰值不再发生 变化时，溶液由桃红色变为黄色，停止加样．重复3次，计算水溶液中Cys的准确含量，取平均值． 2结果与讨论 2．1紫外-可