常用色谱分析样品制备技术..ppt

* 常用色谱分析样品制备技术 适于色谱分析的样品应满足： 所用色谱柱的进样要求； 所用色谱方法的分离能力； 所用色谱方法的检测能力。 注意： 防止欲测组分丢失； 化学反应的收率及是否有副反应； 防止污染（作空白实验检查）； 一 溶剂萃取 实质：物质从一相（固体、液体或气体）转 入到另一相中。 (1)液－液萃取：从液相到液相。石油醚萃取 水样中的致癌芳烃； (2)液－固萃取：从固相到液相。CS2萃取活性 炭中吸附的溶剂； (3)液－气萃取：也叫溶液吸收。从气相到液 相传质。水吸收空气中的甲醇. 1 液液萃取 常用于样品中被测物质与基质分离。 原理：利用样品中各组分在两种不相混溶的溶剂 中的溶解度或分配比的不同，通过选择两 种不相容的液体来控制萃取过程的选择性 和分离效率。 在一定温度下：分配系数为常数 K＝C有机/C水 被萃取部分E=C有机V有机/(C有机V有机＋ C水V水) ＝KV(1+KV) 式中：V- 相比， V有机/V水 包括： 常规液－液萃取 连续液－液萃取 逆流萃取 微萃取 萃取小柱技术 在线萃取 自动液－液萃取 1.1 常规液－液萃取 分液漏斗 10－100mL液相 K10才能使回收率99％ 定量回收需萃取2次或2次以上，每一次都要用新 鲜溶剂 一般情况下，溶剂体积约为样品溶液的30％－35 ％. 1.2 连续液－液萃取 可以处理低K萃取 溶剂用量少 效率高 高挥发物、热不稳定物会损失 1.3 逆流萃取 可以回收分配系数非常小的组分 时间长 1.4 微萃取 采用小体积的有机溶剂进行萃取，相比率V为 0.001-0.01. 回收率差 1.5萃取小柱技术 在聚乙烯管中填充经过煅烧助溶的高纯硅藻土就成了萃取小柱（管体积0.3-300mL）; 先用样品润湿萃取小柱几分钟，再加入有机萃取剂，当有机溶剂还保存在萃取小柱中时，分别调节pH为4.5和9.0,从而萃取出样品中的酸性或碱性物质; 可用于体液萃取. 1.6在线萃取 欲萃取物质连续地被引入含有活性的或者络合剂的水相中在混合反应环中发生化学反应或络合反应，生成被萃取物含有被萃取物的多水蒸气在相沉淀器中沉淀在相分离器中分离 优点：样品体积可以很小（100mL） 费用低（溶剂和有机溶剂用量少） 萃取在密闭系统中进行 缺点：灵敏度低 装置复杂 1.7自动液－液萃取 对于液体易于分散和混合的体系，可以用自动液－液萃取，在小样品瓶中进行; 可以通过自动进样器的针头交替地抽取或注入溶剂和样品溶液在小样品瓶中进行液－液萃取; 有商品化的自动液－液萃取装置，如美国OI分析公司研制的ExCell自动液－液萃取系统. 1.8 破乳的常用方法 1.8.1 乳化形成的原因 有机相 水相 乳化物 外力 应根据乳化形成的原因采用相应的措施破乳 1.8.2 破乳的常用方法 加盐 使用加热－冷却萃取容器 用玻璃棉塞过滤乳化液样品 用相过滤纸过滤乳化液样品 离心 加入少量不同的有机溶剂 因有机相与水相比重接近引起的乳化，可以在水溶液中加NaCl至饱和，提高水相比重使两相分层; 酸性乙醇浸取法、三氯乙酸沉淀蛋白法、冷冻除油脂法等可以除掉生物样品中的蛋白质和脂肪等乳化物; 两相体积比为1：（5－10）可有效地防止乳化; 缓慢振摇可以防止剧烈振摇产生的乳化现象; 全部乳化的样品可以离心破乳（2000r/min，2min）; 非挥发性物质可以用沸水浴蒸干后再萃取; 两相比重相差较大形成的乳化，可以加无水乙醇破乳; 轻度乳化，可以用玻璃棒搅动或用细铁丝摩擦内壁破乳. 固相萃取 包括两个过程： 固体样品中欲测组分分子溶于溶剂中； 欲测组分分子与溶剂分子相互扩散. 扩散又包括： (1)分子扩散:固体样品表面与溶剂接触处， 影响萃取的因素主要有：温度 被萃取物质的分子大小 液体介质黏度 (2)对流扩散：远离固体样品表面处, 影响萃取的因素主要有： 流动液体的速度和状态 液体黏度 样