14 蛋白质及生物合成.ppt

第十三章 蛋白质的生物合成（翻译）;第一节 蛋白质合成体系;20种氨基酸(Aa)作为原料 酶及众多蛋白因子，如IF、EF、RF 供能物质（ATP、GTP）、无机离子;mRNA中每三个相邻的核苷酸组成三联体，代表一个氨基酸的信息，此三联体就称为遗传密码(codon)。共有64种不同的密码。其中：;遗传密码具有以下特点： ① 连续性；② 简并性；③ 通用性；④ 方向性；⑤ 摆动性。;遗传密码的连续性;从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框(open reading frame, ORF)。 ;遗传密码字典;遗传密码的简并性;密码子与反密码子的摆动配对;U;1966年Crick根据立体化学原理提出：;蛋白质与rRNA的重量比约为1:2。核糖体是蛋白质合成的场所。 核糖体的存在形态有三种：单核糖体、核糖体亚基和多核糖体。;真核生物：游离核糖体或与内质网结合 原核生物：游离核糖体或与mRNA结合成串状的多核糖体(提高翻译效率)。 核糖体亚基的聚合（10mmol/L）与解聚（0.1mmol/L)与Mg2+浓度有关;1.不同来源核糖体的大小和RNA组成;2. 核糖体存在三个重要的tRNA的结合部位（大肠杆菌） A位、P位和E位，三者紧密连接，各占一个密码子的距离。 (1)A位：氨酰基位，可与新进入的氨基酰tRNA结合；由大、小亚基成分构成。 ⑵P位：肽酰基位，可与延伸中的肽酰基tRNA结合；由大、小亚基成分构成。 ⑶E位：又称排出位，空载tRNA脱离核蛋白体前的结合位点；主要由大亚基成分构成。;原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式;多核糖体 大肠杆菌由一定数目的单个核糖体与一个mRNA 分子结合而成的念珠状结构。每个核糖体可独立完成一条肽链的合成，所以在多核糖体上可以同时进行多条肽链的合成，提高了翻译的效率。;三、tRNA与氨基酸的活化;tRNA有两个关键部位： ⑴ 3’端CCA：接受氨基酸，形成氨酰-tRNA。需ATP提供活化氨基酸所需的能量。 ⑵ 与mRNA结合部位：反密码子部位;氨基酸臂;能够识别mRNA中5′端起始密码AUG的tRNA是一种特殊的tRNA，称为起始tRNA。 在原核生物中，起始tRNA是一种携带甲酰蛋氨酸的tRNA，即fMet-tRNAffmet；而在真核生物中，起始tRNA是一种携带蛋氨酸的tRNA，即Met-tRNAfmet。 在原核生物和真核生物中，均存在另一种携带蛋氨酸的tRNA（Met-tRNAm），识别非起动部位的蛋氨酸密码AUG。 ;氨基酸的活化与携带反应由氨基酰tRNA合成酶催化。;氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性：Aa识别出现错误，此酶具有水解功能，可以将其水解掉。 tRNAIle——携带Ile的tRNA Ile- tRNAIle——异亮氨酰-tRNAIle 氨酰-tRNA合成酶和之相对应的tRNA分子被称为遗传密码第二。;与多肽链合成起始有关的蛋白因子称为起始因子（initiation factor，IF）。 原核生物中存在3种起始因子，分别称为IF1-3。在真核生物中存在9种起始因子（eIF）。 IF的作用主要是促进核蛋白体小亚基与起始tRNA及模板mRNA结合。 ;与多肽链合成的延伸过程有关的蛋白因子称为延长因子（elongation factor，EF）。 原核生物中存在3种延长因子（EFTU，EFTS，EFG），真核生物中存在2种（EF1，EF2）。 EF的作用主要促使氨基酰tRNA进入核蛋白的A位，并可促进移位过程。 ;与多肽链合成终止并从核蛋白体上释放有关的蛋白因子称为释放因子（release factor，RF）。 RF在原核生物中有3种，在真核生物中只有1种。;RF的生物学功能主要有： 识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 诱导转肽酶改变为酯酶活性，使肽链从核蛋白体上释放。 ;多肽链合成时，需ATP、GTP作为供能物质，并需Mg2+、K+参与。 在蛋白质合成过程中，每形成1个肽键要消耗3分子的ATP，其中1个用于氨基酸活化，肽链延长时，每形成一个肽键要分解2GTP，此外，合成起始时还要多消耗1个GTP，故蛋白质合成耗能很大。 ;第二节 蛋白质生物合成过程;蛋白质生物合成过程包括三大步骤： ①氨基酸的活化与搬运； ②活化氨基酸在核蛋白体上的缩合； ③多肽链合成后的加工修饰。;包括以下几个步骤：;IF-3;A;S-D序列;;IF-2;IF-3;;（二）真核生物翻译起始复合体形成;是循环反应（核蛋白体循环）：翻译起始复