层析技术PPT(如何选择合适及极性).pptVIP

常 用 层 析 方 法 按分离原理分为： * 吸附层析：利用吸附力的差别进行分离。* 分配层析：利用二种不互溶的溶剂中分配比不同进行分离。* 离子交换层析：利用阴阳离子的交换作用达到分离。* 凝胶层析：利用分子量大小进行分离。 * 电泳：利用在同一电场的作用下泳动的方 向和速度不同而分离。 按分离形式分为： 薄层层析（Thin Layer Chromatography) 普通TLC；高效TLC； 制备TLC； 离心TLC； 柱层析（Column Chromatography) 普通C C；制备C C ( 快速CC; 低压CC； 中压CC；高压CC） 电泳（Electrophoresis) 纸电泳(PE)； 毛细管电泳(CE) ???????????? 含水量% ? 氧化铝的活性 0 ? I 级 3 ? II 级 6 ? III 级 10 ? IV 级 15 ? V 级 ??????????? 氧化铝的适用性 * 碱性氧化铝：应用于碳氢化合物的分离，以 及中性、碱性物质的分离，不适用于酸性 成分的分离。 * 中性氧化铝：属于碱性吸附剂范畴，对于分 离碱性中草药成分颇为理想，使用范围最广 泛，不适合于酸性成分的分离。 * 酸性氧化铝：表面常带有NO3-或Cl-，具有离 子交换剂的性质，适合于酸性成分的层析。 汉防己甲素 汉防己乙素 对甲氧基偶氮苯 苏丹红 ?????????? 含水量% ? 硅胶的活性 0 ? I 级 5 ? II 级 15 ? III 级 25 ? IV 级 38 ? V 级 ?????????? 硅胶的适用性 能用于非极性化合物，也能用于极性化合物。适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、脂肪酸、氨基酸以及合成产品如：有机金属化合物等。 聚酰胺的适用性 分离极性和非极性物质，如：黄酮体、酚类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、甙类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离。 凝胶层析同义词： 凝胶过滤层析(gel filtration chromatography) 分子筛过滤层析(molecular seive filtration -) 阻滞扩散层析(restricted diffusion -) 排阻层析(exclusion chromatography) 凝胶渗透层析(gel permeation chromatography) Sephadex 葡聚糖凝胶 Sephacryl 凝胶 Sepharose 琼脂糖凝胶 分子筛的适用性 水溶性的高分子化合物，如：蛋白质，多肽，核酸，多糖等。 Sephadex LH20 适用于水溶性差的有机物质的分离，如：脂类、固醇类、黄酮类、大环内酯类等分子量差别大的化合物。 离子交换层析适用性 能在水溶液或含水极性溶剂中产生游离离子基团的酸、碱及两性成分。可用于氨基酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类等水溶性成分的分离。 使用离子交换剂使物质分离表 中药煎剂 ? 强酸型(磺酸型) 稀NH4OH洗脱 ?通过液 ? 酸性、中性化合物 解离型、两性化合物 ?